复方丹参片—原儿茶醛和丹参酮ⅡA的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定复方丹参片中原儿茶醛和丹参酮ⅡA的含量。

本方法适用于中药制剂复方丹参片。

供试品于锥形瓶中，分别加水和85%乙醇进行超声处理，放冷，离心，上清液滤过，得滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm和269nm处检测原儿茶醛和丹参酮ⅡA的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 乙醇

3. 醋酸

4. 醋酸铵

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Shimpack CLC-ODS色谱柱（150×6.0mm，5μm)。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 0.2mol/L醋酸铵缓冲液（pH=2.2) = 10 90 和甲醇 水 = 85 15

2.2 检测波长：280nm、269nm

2.3柱温：35℃

1. 称取供试品

精密称取本品12片研细的药粉（过5号筛，80目)，分为2份，一份相当于4片药粉，另一份相当于8片药粉。

2. 对照品溶液的制备

精密称取原儿茶醛对照品适量，水溶解制成1.53，3.06，6.12，12.24，18.36μg/mL的系列

浓度对照品溶液。

精密称取丹参酮ⅡA对照品适量，用95%乙醇溶解制成1.56，3.12，6.24，12.48，18.72μg/mL

的系列浓度对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

取一份供试品置100mL锥形瓶中，加水30mL，超声处理30分钟后，放冷，转入50mL容量瓶，用水稀释至刻度，以10000r/min离心5min，上清液滤过，取续滤液为供试品溶液Ⅰ（测定原儿茶醛)。

取另一份供试品置100mL锥形瓶中，加85%甲醇30mL，超声处理15分钟后，放冷，转入50mL容量瓶，用85%甲醇稀释至刻度，以10000 r/min离心5min，上清液滤过，取续滤液为供试品溶液Ⅱ（测定丹参酮ⅡA)。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 标准曲线绘制

精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长280nm和269nm处测定原儿茶醛和丹参酮ⅡA的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长280nm和269nm处测定原儿茶醛和丹参酮ⅡA的吸收值，计算出其含量。

李元智，黄英，刘三康等. HPLC测定复方丹参片中原儿茶醛和丹参酮ⅡA. 华西药学杂志，1996，11（4)：213-215.