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分别精密量取已知含量的样品(批号：081014)1.0 mL分置9个50 mL的量瓶中;分别精密量取混合对照品储备液4，5，6 mL各3份分置上述量瓶中，充分混匀，加稀释溶剂稀释至刻度，摇匀，按含量测定项下进行测定，计算分别取上述溶液20 μL，依次注入液相色谱仪，记录色谱图，计算回收率，结果见表1。
2.7 样品测定
分别精密吸取“2.2.1”项下制得的混合对照品溶液及3个批号的供试品溶液，各进样20 μL，测定，每个批号平行3份，以外标法计算供试品的含量，结果见表2。
表1 回收率测定结果(略)
表2 样品含量测定结果(略)
3 讨论
在色谱柱的选择上，在同等的条件下，本研究中比较了如下几种色谱柱：Thermo ODS C18( 4.6 mm×150 mm,5 μm),Poresphere C18(4.6 mm×150 mm，5 μm),Hypersil C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),Venusil XBP-C18(4.6 mm×150 mm，5 μm),Acclaim 120 C18(4.6 mm×150 mm，5 μm),Kromasil C18 柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)。观察发现使用前面5种柱子时，盐酸环丙沙星拖尾现象比较严重，理论塔板数均达不到2000，只有Kromasil C18 柱的柱效比较高，峰形好，如图1所示;而阿昔洛韦在以上几种柱子中的分离效果均比较满意，对色谱柱的要求相对较低，因此在分离与环丙沙星的性质与结构类似的物质时，色谱柱的选择是关键。
在流动相的选择时，参考文献[2]后，主要采用能较好分离环丙沙星的流动相成分与比例，同时兼故阿昔洛韦，经过反复试验，最终选择如“2.1.1”项下的流动相，结果亦同样证实该条件下环丙沙星和阿昔洛韦的峰形好，保留时间适宜，柱效高，分离效果较好医.学全.在.线网站www.med126.com。
由“2.2.2”项下的供试品溶液在200~350 nm波长范围内二极管阵列检测器在线扫描图谱可可知，环丙沙星和阿昔洛韦的最大吸收波长分别为280 nm、253 nm。比较二者在各自最大吸收波长处的峰面积，尽管两者含量相差仅3倍但环丙沙星峰面积几乎是阿昔洛韦的7倍。为了减少试验误差，增加检测的灵敏度，本研究中将检测波长设定为253 nm。
本文采用高效液相色谱法同时测定复方环昔滴眼液中环丙沙星和阿昔洛韦的含量，方法简便、准确，重复性好，专属性强，可作为该自制制剂的质量控制方法。
【参考文献】
1] 杨桂兰,郭学平,栾贻宏.不同相对分子质量透明质酸钠的应用[J].食品与药品,2005,7(12):1-3.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京：化学工业出版，2005：289,527.
[3] 马 力,程 斌,岑 丽.高效液相色谱法测定复方阿昔洛韦乳膏中阿昔洛韦和甲硝唑的含量[J].中国医院药学杂志，2005，25(7):636-637.
[4] 孙文武，张小平，汪 筠.HPLC法同时测定复方环丙沙星滴耳液中2种组分的含量[J].中国药师,2005,8(3):223-224.
[5] 郑 芳,刘 菁,朱雪松,等.RP-HPLC法同时测定复方诺氟沙星滴耳液中两组分的含量[J].郧阳医学院学报,2009,28(1):36-38.
