| 公开(公告)号 | CN1432408A |
| 公开(公告)日 | 2003.07.30 |
| 申请(专利)号 | CN02102302.6 |
| 申请日期 | 2002.01.15 |
| 专利名称 | 牛乳腺炎疫苗的制备方法 |
| 主分类号 | A61K39/02 |
| 分类号 | A61K39/02;A61K39/108;A61P31/04 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 恒信环球农业科技有限公司 |
| 发明(设计)人 | 詹古拉 |
| 地址 | 美国加利福尼亚洲 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京集佳专利商标事务所 |
| 代理人 | 王学强 |
| 国省代码 | 美国;US |
| 主权项 | 一种制备牛乳腺炎疫苗的方法，包括如下步骤：a.提取含有蔗糖-6果糖转移酶(sacB)基因的质粒；b.制备革兰氏阴性菌感受态细胞；c.转化步骤a中提取含有的蔗糖-6果糖转移酶(sacB)基因的质粒进入步骤b所制备的革兰氏阴性菌感受态细胞中；d.鉴定，获得转化的革兰氏阴性菌；e.已转化的革兰氏阴性菌在细菌培养基中生长直到浓度达到105-1012CFU/ml；f.收集步骤e中的已转化的革兰氏阴性菌，室温，400g，离心20分钟；g.弃上清液，用1-10％(体积比)的蔗糖和清洗物质清洗疫苗，重悬浮，在37℃下，混合20分钟，诱导自杀性蔗糖-6果糖转移酶(sacB)基因表达，混合物在400g，4℃下再次离心，弃上清液；h.重复步骤g两次；i.疫苗在清洗物质中被悬浮，按佐剂和疫苗体积比为3∶2的比例加入佐剂，使疫苗每一次免疫量的浓度为8.0×105CFU或以上。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种牛乳腺炎疫苗的制备方法。本发明提供了利用含有核心通用抗原的革兰氏阴性菌，通过含有蔗糖-6果糖转移酶(sacB)基因质粒的转化，在蔗糖的诱导下，使革兰氏阴性菌自杀，收集这些含有核心通用抗原的革兰氏阴性菌，制备牛乳腺炎的疫苗的方法。本发明牛乳腺炎疫苗的制备方法不会对疫苗的免疫原性造成损害，不会产生替代的或非天然的疫苗抗原，所用的化学诱导物质是食用的无毒的蔗糖。同时可以大大减少疫苗中的内毒素，减少副作用，刺激免疫系统抵御全部的大肠杆菌，沙门氏菌等革兰氏阴性菌所引起的牛乳腺炎。 |
| 国际公布 |
