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用于生产口蹄疫疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法

公开(公告)号 CN1429907A  
公开(公告)日 2003.07.16  
申请(专利)号 CN01145166.1  
申请日期 2001.12.31  
专利名称 用于生产口蹄疫疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法  
主分类号 C12N15/33  
分类号 C12N15/33;C12N15/82;C12N15/90;A01H1/00;A61K39/12;A61P31/12  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 甘肃亚盛集团;中国科学院遗传研究所  
发明(设计)人 周长生;陈正华;杜若甫;胡赞民  
地址 730030甘肃省兰州市张掖路219号基隆大厦21层  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 中科专利商标代理有限责任公司  
代理人 李悦  
国省代码 甘肃;62  
主权项 一种用于生产口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法,包括以下步骤:(1)构建用于向油菜叶绿体中定点转化外源基因的油菜叶绿体相关DNA序列;(2)合成编码口蹄疫多肽疫苗的基因序列,使该序列与报告基因或具有强免疫源性蛋白的基因串联得到融合的口蹄疫多肽疫苗基因;(3)将步骤(1)构建出来的DNA序列与步骤(2)合成的融合的口蹄疫多肽疫苗基因重组,使融合的疫苗基因序列位于油菜叶绿体相关DNA序列的中间;(4)将步骤(3)中重组得到的DNA片段插入到克隆载体的多克隆位点上,作为口蹄疫多肽疫苗基因油菜叶绿体定点转化载体;和(5)用步骤(4)得到的转化载体转化油菜,获得叶绿体表达口蹄疫多肽疫苗的转基因植物。  
摘要 本发明涉及一种用于生产口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物的获得方法。方法包括:克隆油菜叶绿体基因组同源重组片段SEQ IDNO:1所示序列,以及SEQ ID NO:2所示序列,并用这两个DNA片段构建油菜叶绿体定点转化载体,在载体上这两个片段之间,插有口蹄疫多肽疫苗基因(即SEQ ID NO:3及SEQ ID NO:4所示序列)与绿色荧光蛋白或其它报告基因串联而得的融合疫苗基因。并将融合基因插入一种克隆载体中。通过转基因技术,使该基因的同源重组序列与油菜叶绿体发生定点整合。再经对油菜细胞的筛选与植株诱导与培育,最终获得表达口蹄疫多肽疫苗的油菜叶绿体转基因植物。  
国际公布  
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