| 公开(公告)号 | CN1706940A |
| 公开(公告)日 | 2005.12.14 |
| 申请(专利)号 | CN200410046398.9 |
| 申请日期 | 2004.06.09 |
| 专利名称 | 重组人超氧化物歧化酶的提取方法 |
| 主分类号 | C12N9/02 |
| 分类号 | C12N9/02;C12N1/21 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 唐志泉 |
| 发明(设计)人 | 唐志泉;侯伟文;李如华 |
| 地址 | 100000北京市平谷开发区府前路21号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京汇泽知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 闫立德 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种重组人超氧化物歧化酶的提取方法，其特征在于该方法包括下列步骤；(1)将含有人体SOD基因的PCR252载体的大肠杆菌接种子培养基中，在32℃的温度下，发酵培养24小时，再加入占发酵液重量1％的硫酸铜清液，再向发酵液加入3倍体积的去离子水，用震动式破碎机剧烈震动破碎30min，静置20min，置入每分钟2000转的离心机中，离心分离，除去沉淀杂质，得清澈透明粗酶液；(2)将粗酶液置入纯酶仪中分离，去杂质，再加入4℃的等量体积的去离子水，超滤浓缩，得等量体积50％的SOD的粗抽提液，再向粗抽提液中加入等量4℃的冷丙酮，分级沉淀，去除底部杂质，得SOD浓缩液；(3)将SOD浓缩液用2倍体积的去离子水溶解，再次置入每分钟2000转的离心机中，离心分离，除去沉淀杂质，得SOD浓缩清液，将浓缩清液4℃冷冻48小时静止后，除去沉淀杂质，超滤浓缩，冷冻干燥，即得药用SOD冻干品，该产品酶活性为8000U～15000U/mg。 |
| 摘要 | 本发明属于一种重组人超氧化物歧化酶的提取方法，该方法将含有人体SOD基因的PCR252载体的大肠杆菌接种子培养基中，发酵培养，再向发酵液加入去离子水，用震动破碎，离心分离，除去沉淀杂质，超滤浓缩，再向粗抽提液中加入冷丙酮，分级沉淀，再次离心分离，除去沉淀杂质，超滤浓缩，冷冻干燥，即得药用SOD冻干品，该产品酶活性为8000U～15000U/mg，本发明采用生物基因复制技术，克服超氧化物歧化酶带有病毒的隐患，使其具有简单的工艺，较低的加工成本，提取时间短和提取率高的优点。 |
| 国际公布 |
