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1.2 细胞培养
人宫颈癌HeLa细胞株为西安交通大学生物医学研究实验中心提供，培养于含100mL/L FBS的RPMI 1640培养基中，于含50mL/L CO2、饱和湿度和37℃条件下培养，细胞浓度为5×104/mL。
1.3 实验分组 实验分为对照组和处理组。处理组分为0.125、0.25、0.5和1mmol/L PE 4组。细胞在正常培养基中培养24h后，用含有不同浓度PE的培养基更换并继续培养到测试时间。
1.4 细胞增殖检测
用MTT法测定。选用对数生长期的HeLa细胞，以5×104/mL的细胞密度接种于96孔平底细胞培养板中，每孔总液量200μL。接种第2天换处理培养基，继续培养到测试时间前4h，每孔加入MTT液20μL，37℃、50mL/L CO2下继续孵育至测试时间，弃上清液，每孔加入DMSO 150μL，振荡5min，在高通量多功能微板测试系统波长490nm下测定每孔光的吸光度值(A490)医.学全.在.线www.med126.com。
1.5 细胞周期分析
选用对数生长期的HeLa细胞，以5×104/mL的细胞密度接种于24孔平底细胞培养板中，每孔总液量1mL。处理同前，消化、固定并收集细胞，每孔细胞加PI(100mg/L)染液100μL，避光，37℃孵育30min，上流式细胞仪检测。结果用随机软件分析。
1.6 细胞凋亡检测
使用AnnexinPI法。消化后，细胞用冷PBS洗2次，调整浓度到1×105/mL。取100μL细胞，并加入5μL FITCAnnexin V及5μL PI(浓度250mg/L)，混匀后置于冰浴上闭光孵育10min，在BD公司流式细胞仪检测，光源为488nm氩离子激光器，FITC受激发后发绿色荧光，PI发红色荧光，结果用随机软件分析。
1.7 统计分析
用SPSS11.0软件分析，实验数据以±s表示，采用t检验。
2 实验结果
2.1 PE抑制HeLa细胞生长
PE作为细胞膜的重要成分，具有维持细胞膜稳定性的作用。外源PE可以显著地抑制HeLa细胞生长，并呈时间和剂量依赖性。对照组HeLa细胞呈三角形或多角形，细胞轮廓清晰，立体感较强。PE处理48h后，细胞发生变形，立体感降低，细胞轮廓趋于模糊;在高浓度时，圆形细胞增多(图1A)。在PE处理72h时，0.5和1mmol/L浓度各组细胞生长抑制持平(图1B)。各处理组与对照组之间均存在显著性差异(P<0.01)。
2.2 PE不影响HeLa 细胞的细胞周期
细胞生长抑制受细胞增殖周期阻滞和细胞凋亡的影响。在PE抑制细胞生长的过程中，未观察到细胞增殖周期的阻滞。PE处理组在G1/G0、S和G2/M的细胞分布与对照组相比，均无显著性差异(P>0.05)，表明PE不影响细胞增殖周期(图2)。
2.3 PE诱导了HeLa细胞的凋亡
应用AnnexinPI法测定了PE处理24h的HeLa细胞凋亡情况。结果显示，0.125mmol/L PE已具有诱导HepG2细胞凋亡的作用，随着PE浓度的增加，细胞凋亡随之升高。0.5mmol/L和1mmol/L PE分别在早期凋亡和晚期凋亡达到高峰(图3)。
