绪 言
一、病理生理学实验的性质及内容
病理生理学是一门理论性的,同时也是一门实验性的科学,其主要研究方法之一为动物实验。即在人为控制的条件下,在动物身上复制各种类似人类疾病的动物模型。观察疾病时机体的生理机能和生化代谢的变化及其发生发展的全部过程,进而阐明疾病发生发展的原因和机制,揭示疾病演变和转归的基本规律及病理过程的动物身上。采取各种措施进行实验性治疗,为治疗学提供理论和实践的依据。
病理生理学常用的实验方法有以下两种:
(一)急性实验:在短期内在动物体内复制疾病模型,观察其发生民展及结局。因为急性实验常常是在麻醉手术创伤、失血等条件下进行,因此观察到的现象,有时不能完全说明整体动物在生理条件下的机能代谢活动规律。因此在实际应用中,我们必须最大限度地缩小和避免其缺点,如要选择健康的实验动物,麻醉方法要适宜,手术要轻巧迅速等。对实验结果要进行全面、客观地分析,才能比较如实的反映患病机体的客观变化。由于实验课的学时有限,大多数教学多采用急性实验。
(二)慢性实验:这是在指无菌的条件下,给动物实行一定的外科手术(例如各种瘘管、脏器的切除或移植),待其恢复健康后再进行实验观察,或者把一定的致病因子作用于动物复制近似人类的慢性疾病模型,对疾病过程的各种变化进行细致而长期的动态观察。这类方法的最大优点是坚持了实验动物机体的完整性及其与外界环境的统一性,动物处于比较接近自然的状态,因此所观察到的结果比较接近实际。但由于慢性实验时间长,实验设备和技术要求高,动物园的饲养和护理要求较严不宜作为教学实验。既使根据教学需要做一些慢性实验,同学们也只能观察到慢性实验全部过程中的一部分。
以上实验均是用动物复制疾病模型,它和人体的疾病来比较,仍有一定的距离,因此所得的实验材料,不能无条件的照搬于人体,还必须和临床观察紧密的地联系起来。
二、病理生理学实验课的目的和要求
病理生理学实验课的目的,在于使同学通过实验验证和巩固部分病理生理学讲授的基本理论,了解和初步掌握复制疾病模型的实验方法及病理生理学实验的基本操作技术,并通过实验逐步培养和提高学生的观察事物、分析问题、解决问题的能力。培养同学对科学工作的严肃态度,严密的工作方法和实事求是的工作作风。
为了达到实验课的目的,要求同学必须遵守以下实验规则:
(一)实验前要仔细阅读实验指导、了解实验目的、实验步骤和主要观察指标及其意义,同时结合实验内容,复习有关理论,以便对实验结果进行分析和讨论。
(三)实验前要仔细检查器材、药品有无短缺或损坏,如发现上述情况及时报告教师,然后到技术室登记领取。实验时,每组同学必须明分工,各尽其责、密切合作,使实验有条不紊地顺利进行。各种分工,在不同的实验中轮流担任,使同学都能在实验的各个方面得到学习和锻炼。顺利进行。各种分工,在不同实验中轮流担任。使同学都能在实验的各个方面得到学习和锻炼。
(四)实验操作时,要按操作规程使用仪器,要爱护仪器和公共财物,无故损坏者,按超定进行处理。
(五)仔细、耐心地观察实验过程中出现的每一反应和变化,实事求是地记录下来,并运用所学的理论,对实验结果进行分析讨论。
(六)实验结束后,应将实验所用器材擦洗干净、清点、整理,如有损坏、缺少,应及时报告负责老师、说明储况。同时做好实验室的清洁卫生工作,关好门、窗、水电等,经教师允许方能离开实验室。
(七)每次实验后,均应告出实验报告,这是病生教学实验的组成部分,因此要求取学必须作为一项基本功认真完成,实验报告书写要精确,扼要,全面,字迹清楚,实验报告包括下列内容。
1、系别:年级、小组、姓名、实验日期
2、实验题目
3、实验目的
4、实验动物:种类、性别、体重、数量,健威状况或一般倘况。
5、实验方法:原则上应写出,因实验指导已写清楚,一般从略。如果仪器、药品或方法临时有所变更,可作简短说明。
6、实验结果:是实验中最重要的部分。应将实验过程申观察到的现象实事求是的记述。记述方式可包括为三种(1)文字描述 (2)曲绒图 (3)表格等。根据不同的结果采用最准确,清楚和适宜的形式。如血压、呼吸变化,尽量用曲线图记录实验结果。
7、实验讨论:讨论是根据所学的理论知识对结果进行分析、推理、逐步导向结论的思维过程。讨论必须依据本组的实验结果,如果本组因故未能完成,则应认真总结本实验失败的原因和教训,并另安排时间补做。
8、实验小结:通过分析讨论。对本次实验所能验证的概念、原则和理论,用简明扼要的文字做一概括。其中也可以包括个人的体会和经验教训。
三、动物实验的基本知识
(一)实验动物的捕捉与固定方法
1、大白鼠的捕捉与固定。
先用右手抓住鼠尾放于鼠笼上;在其向前爬行时, 甩左手拇指和食指迅速抓住小白鼠两耳和颈后部的皮肤,用左手的无名指和小指夹住鼠尾和后肢,这样即可以用左手将小白鼠固定,右手可作注射或其它实验操作。
2、兔的捕捉与固定。
先用右手抓住兔背部皮肤,轻轻提起,再用另一只收手托住其臀部使其呈坐位姿势,放在兔台上。最好不要提兔耳,以免家兔过度挣扎而将免耳软骨折断或失去生理储况,影响实验结果,然后用四根已打好活套的绳子绑住家兔四肢的踝部上一厘米处,将家兔放置呈仰卧位,先将两前肢绑绳在背后交叉,交叉过来的绳子压住上肢,分别对称地绑在兔台边缘的圆孔或小立柱上,两后肢不用交叉。然后将兔嘴固定于兔台前端的立柱上。
(二)实验动物的注射法
1、家兔耳缘静脉注射法
首先将家兔耳缘部的毛剪去或拔去,井用一手压迫耳静脉近心端,使静脉充血,用左手拇指和食指持www.med126.com/zhicheng/耳尖,右手持注射器,先从靠耳尖部的血管开始注射,使针尖指向近心端并与皮肤呈10度角,从正面刺入血管,待进入血管后,立即使针头与血管呈平行位置,用左手将兔耳及针头固定右手食指和中指夹针管拇指推针心,将药液注入,若针头巳进入血管,肉眼可见药液流入血管内。也可向外略抽一下注射器针心。如有血液回流,即可进行药物注射,如果阻力较大,针尖部皮肤发自肿胀。说明巳注入血管外,应将针头抽出,重新注射。注射完毕,用棚球压迫刺口处,再抽出针头,并轻轻揉压片刻以防出血。
2、小白鼠腹腔注射;
将小白鼠固定在右手中,右手持汪射器,将针头从左鼠下腹部朝头部方向刺入腹腔,回抽注射器时,如无回血或尿液,表示针头未刺入腹腔脏器和膀胱,即可进行注射。注意针头不宜靠近上腹部或太深。以免刺破内脏。
(三)实验动物的采血法
1.家兔耳缘静脉取血法
如要采集少量血液,可按耳缘静脉注射法取血,也可用二甲苯轻擦耳缘静脉部。待其充血后,在靠近耳尖部的血管处刺破,兔血即由破口流出,取血后用棉球压迫止血。
2.小白鼠尾部取血法
将鼠固定后,在鼠尾处1/3与内2/3交界处,用剪刀剪去尾尖(或切断)用手轻轻从尾根部向尾尖部挤几下,血液即可流出。如要间隔多次采血,每次采血时,可将鼠尾剪去很少一段,取血后用线将鼠尾残端结扎,以防继续出血。
(四)实验动物的麻醉方法
实验动物的麻醉方法,可分为全身麻碎和局部麻醉。我们教学实验多采用局部麻醉方法。其方法是,用1%普鲁卡因溶液作皮下浸润麻醉,麻醉范围稍大于手术切□,麻醉药物剂量依切口大小和深度而定。
(五)实验动物的呼吸血压描记和常用手术操作
1、家兔的呼吸描记法
将家兔背位固定于兔台上,剪去颈前部之毛,局麻后用手术刀沿颈中线切开皮肤,从胸骨柄上的1厘米处切至喉头下lcm,切口约5~7cm,用止血钳分离皮下组织,肌膜和肌肉,分离出气管后;在其下面穿一粗线,做一虚结,在气管软骨环间做倒"T"形切口,插入气管插管,并将续扎紧固定,用橡皮管连接气管插管之另一侧臂与换能器以描记呼吸运动曲线。
2、家兔的血压描记方法
沿气管一例分离组织。则可露出颈总动脉,将颈总动脉和神经分开,分离出约1.5厘米长颈总动脉。在其下方穿二根浸有生理盐水的细线备用。动脉插管内与相应换能器连接并充满生理盐水。近心端结一虚结,然后于兔耳静脉注入肝素(1%lmL/kg),抗凝,在近心端用动脉夹夹住颈总动脉,其与远心端结扎线相距为1.5cm,左手的拇指和食指提起远心端的结扎线,小指垫在颈总动脉下,右手持眼科剪,在靠近远心结扎处剪颈总动脉周径1/3左右,将已充满生理盐水的动脉插管由切口向心脏方向插入动脉立即将近心端虚结扎紧,使套管紧紧固定在动脉管腔内,然后慢慢打开动脉夹,可见描计曲线有明显波动。如血压比较平稳,可将套管安置于适宜位置,使动脉不致扭曲或拉得过长。将血压曲线描记下来。
3、家兔颈外静脉分离插管术
颈外静脉分布很浅,在颈部皮下胸锁乳突肌外缘。将一切开的皮肤,用手在皮肤外面向上损起,即可见到该www.med126.com/yaoshi/静脉,壁薄而粗大呈暗紫色。暴露静脉以后,沿血管走行方向用血管钳轻轻分离周围的结缔组织,颈外静脉分离出来以后,插管方法与颈总动脉相似,也是向心插入,注意的是,插管前先用动脉夹夹住颈称脉近心端。待血管充盈后,再结扎远心端。这样便于剪口和插管。
4、家兔股动脉分离插管术
家兔背部固定,腹股沟部剪毛,在腹股沟部阴手指触及动脉搏动明显处行局麻,然后沿血管行走方向,做4厘米左右切口。用蚊式钳分离皮下筋腹、肌肉组织后,血管和神经即完全暴露,股静脉位于内刨,股神经位于外侧,股动脉位于中间偏后,细心分出股动脉,于其下方穿过两根细线,将远心端结扎、近心端用动脉夹夹住,将远心端结扎线轻轻提起,用眼科小剪刀,靠近结扎处剪股动脉周径1/3左右,向心方向插入充满生理盐水的动脉插管,用线结扎将插管固定在动脉管腔内。