公开(公告)号 | CN101020066A |
公开(公告)日 | 2007.08.22 |
申请(专利)号 | CN200710013248.1 |
申请日期 | 2007.01.19 |
专利名称 | 一种原位移植构建人类肝癌小鼠模型的方法 |
主分类号 | A61K49/00(2006.01)I |
分类号 | A61K49/00(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 山东大学 |
发明(设计)人 | 白增亮;王 泽;张敬平 |
地址 | 250061山东省济南市历下区经十路73号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 济南金迪知识产权代理有限公司 |
代理人 | 王绪银 |
国省代码 | 山东;37 |
主权项 | 一种原位移植构建人类肝癌小鼠模型的方法,步骤是: [1]人肝癌细胞株的培养:选人肝癌细胞株常规传代培养,备用; [2]荧光染料DiI标记的人肝癌细胞悬液的制备:选取上述对数生长期的人肝癌细胞株之一,与20μg/ml活体荧光染料DiI在37℃~38℃下共孵30min~60min,之后,0.25%无菌胰蛋白酶消化,以基本培养液收集细胞并调整细胞悬液浓度至0.5×106个/ml~1.0×109个/ml; [3]原位移植构建人类肝癌小鼠模型:选用昆明种三日龄乳鼠,腹部皮肤消毒后,利用无菌30-gauge50-μl玻璃微量进样器,将10μl~50μl上述DiI标记的人肝癌细胞悬液,直接移植入乳鼠肝叶内,建立人肝癌小鼠原位移植性模型; [4]模型鉴定。 |
摘要 | 本发明公开了一种原位移植构建人类肝癌小鼠模型的方法,即利用具有正常免疫功能的昆明种乳鼠作为荷瘤受体,于小鼠体外向鼠肝叶内直接注射人肝癌细胞悬液,建立人肝癌细胞原位移植性荷瘤模型。本发明方法实施简单,成功率高,基于本发明,可以在小鼠正常的机体免疫环境下,实时监测肝癌细胞与小鼠免疫系统的相互作用,能够非常真实地模拟人类体内免疫耐受及抗肿瘤免疫的全过程,为免疫生物学药物的筛选及药理的研究提供更为理想的操作平台。 |
国际公布 |