公开(公告)号 | CN1895289A |
公开(公告)日 | 2007.01.17 |
申请(专利)号 | CN200610016927.X |
申请日期 | 2006.06.07 |
专利名称 | 中草药的鉴别方法 |
主分类号 | A61K36/00(2006.01)I |
分类号 | A61K36/00(2006.01)I;G01N27/447(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国科学院长春应用化学研究所 |
发明(设计)人 | 由天艳;周晓光 |
地址 | 130022吉林省长春市人民大街5625号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 长春科宇专利代理有限责任公司 |
代理人 | 马守忠 |
国省代码 | 吉林;22 |
主权项 | 一种中草药的鉴别方法,其特征在于通过毛细管电泳电化学分析方法指纹鉴别中草药,其步骤和条件如下: 1)、分离毛细管和电极的处理 (1)毛细管处理: 毛细管在第一次使用前,通0.1mol L-1NaOH水溶液过夜,在操作过程中,为了保证分析结果的重现性,每次进样间,用1-3min二次水、4-6min缓冲溶液冲洗毛细管; (2)电极的处理: 当分析标准品溶液时,操作前将碳纤维微盘电极(CFE)超声0.5-1.5min;每次操作前将电极超声外,还要将电极在缓冲溶液中循环扫描10-30周(-0.2V-1.2V)进行活化; 2)、缓冲溶液的配制 pH≥9.5的磷酸盐缓冲溶液(PBS)用1.0mol L-1NaOH调pH值,pH值<9.5的PBS缓冲溶液的配制是直接混合Na2HPO4和NaH2PO4的水溶液即可; 3)、中草药中活性成分标准品溶液的制备及其循环伏安实验 活性成分标准品溶液的制备: 将活性成分标准品用甲醇溶解配制成3-8mol L-1的溶液; 活性成分标准品溶液的循环伏安实验: 将33μm CFE在含有标准品的PBS溶液中循环扫描,考察其循环伏安行为; 4)、检测条件的优化,并在此优化条件下进行重现性、检测限和线性范围的考察 检测条件的优化: 在1.0-1.3V间变化检测电位、5-50mmol L-1间变化缓冲溶液浓度、7-11间变化缓冲溶液pH值、5-40s间变化进样时间和5-22.5kV间变化分离电压考察对峰电流、迁移时间、分离度和分离效率的影响; 5)、中草药样品溶液的制备 用带有20-80目筛子的植物粉碎机粉碎草药样品,称取0.3-0.8g的草药样品用甲醇浸泡10-18h,然后水浴超声30-60min,之后2000-3500rpm离心5-10min,此萃取过程再重复1-3次,最后,萃取液定容于5-10mL的甲醇中;进样前,所有的样品溶液均用0.22μm的纤维素酯膜过滤并稀释到所需要的浓度进行分析; 6)、中草药CE-ED指纹图谱的获得 中草药CE-ED指纹图谱的获得是在步骤4)中所获得的最佳条件下进行电泳分析得到的; 7)、对比标准混合溶液和实际样品中活性成分的峰高确定实际样品中活性成分的含量; 8)、对比所获得的CE-ED指纹图谱,分别从几个不同的指纹片段鉴别同种植物的不同部位以及不同种植物,从而鉴别中草药及其混淆品。 |
摘要 | 本发明涉及一种中草药的鉴别方法,其特征在于通过毛细管电泳电化学分析方法指纹鉴别中草药。步骤为:配制缓冲溶液;进行中草药中活性成分标准品溶液的配制及其循环伏安实验;对检测条件进行优化,并在此优化条件下进行重现性、检测限和线性范围考察;中草药样品溶液的制备;中草药CE-ED指纹图谱的获得;通过对比标准混合溶液和实际样品中活性成分的峰高确定实际样品中活性成分的含量;通过对比活性成分的含量及所获得的CE-ED指纹图谱,鉴别中草药。本发明能够建立中草药的标准CE-ED指纹图谱,同时进行活性成分的定量检测,具有高的分离效率、低的检测限、成本低、重现性好等优点,是控制及评价中草药质量的先进方法。 |
国际公布 |