公开(公告)号 | CN1480537A |
公开(公告)日 | 2004.03.10 |
申请(专利)号 | CN02131070.X |
申请日期 | 2002.09.28 |
专利名称 | 通过检测人类T细胞受体TCR基因在治疗前后的变化来评价治疗HIV药物疗效的方法 |
主分类号 | C12Q1/68 |
分类号 | C12Q1/68 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 北京佰仁思生物工程有限责任公司 |
发明(设计)人 | 寇忠琛 |
地址 | 102200北京市海淀区中关村科技园区昌平园星火街6号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京汇泽知识产权代理有限公司 |
代理人 | 张若华 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 通过检测人类T细胞受体TCR基因在治疗前后的变化来评价治疗HIV药物疗效的方法,其步骤为:a.血样经采集分离后,得到外周血单个核细胞(PBMC),再进一步分离出CD4或CD8T细胞;b.分离和提纯出T细胞的mRNA后,通过mRNA合成得到cDNA;c.在极其靠近CDR3区段V基因区设计24个内侧Vβ基因引物和一个侧Cβ基因引物,C区基因引物的5′端插入七个非模板碱基(GTTTCTT),Cβ基因引物采用高灵敏度的荧光(6-FAM)标记;d.将设计的引物和由mRNA合成的cDNA通过两次PCR反应来扩增cDNA;e.将经过两次PCR反应扩增并被荧光标记的T细胞受体基因,与甲酰胺混合后94℃变性,将样本置于含6%丙烯酰胺的测序凝胶中,在DNA测序机上运行,得到的数据用ABIPRISMGeneScan分析软件进行分析和量化,得出药物疗效的评价结果。 |
摘要 | 发明提供一种通过设计的特定引物来完成PCR反应,放大感染HIV病毒的患者的T细胞受体TCR基因在接受药物治疗前后的变化,进而评价药物的疗效的方法,本发明提供的技术不但填补了技术上的空白而且具有灵敏度高,准确性好的优点。 |
国际公布 |