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重组人红细胞生成素制剂的制备生产方法

医药数据库中心 药学论坛 沈阳三生制药股份有限公司/娄丹;徐莉萍;邹钟诚
公开(公告)号 CN1142281C  
公开(公告)日 2004.03.17  
申请(专利)号 CN98100248.X  
申请日期 1998.01.19  
专利名称 重组人红细胞生成素制剂的制备生产方法  
主分类号 C12N15/79  
分类号 C12N15/79;C12N15/67;C12N1/00;C12P21/02;C07K14/505  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 沈阳三生制药股份有限公司  
发明(设计)人 娄丹;徐莉萍;邹钟诚  
地址 110141 辽宁省沈阳市经济技术开发区十号路1甲3高军  
颁证日 2004.03.17  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 辽宁;21  
主权项 一种表达人红细胞生成素的方法,包括对于含有编码人红细胞生成素的核苷酸序列的CHO细胞进行培养,其特征在于,先用含有胎牛血清的DMEM培养基将含有编码人红细胞生成素的核苷酸序列的CHO细胞接种液在细胞罐内扩增培养,再将培养基更换为无血清的合成培养基,连续灌流培养,所述无血清的合成培养基中含有胰岛素、转铁蛋白、糖及碳酸氢钠。  
摘要 本发明公开了一种大规模生产人红细胞生成素的制剂方法。该方法包括用添加了胰岛素和转铁蛋白的营养培养基,于特定培养条件下培养携带人促红细胞生成素DNA编码序列的被转化的哺乳动物细胞,以获得该蛋白质产物的高表达。然后对富含人红细胞生成素的收获液依次进行亲和层析、离子交换、反相高效液相及凝胶过滤纯化,以获得纯度高并具有高生物活性的人红细胞生成素。  
国际公布  
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