| 公开(公告)号 | CN1120238C |
| 公开(公告)日 | 2003.09.03 |
| 申请(专利)号 | CN98101753.3 |
| 申请日期 | 1998.05.04 |
| 专利名称 | 以粘粒为基础构建重组单纯疱疹病毒及其用途 |
| 主分类号 | C12N7/01 |
| 分类号 | C12N7/01;A61K39/245;A61P31/22;//C12N7/01,C12R1:91 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 本元正阳基因技术股份有限公司 |
| 发明(设计)人 | 吴小兵;伍志坚;董小岩;侯云德 |
| 地址 | 100176北京市北京经济技术开发区永昌中路6号董小岩 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种用于产生重组单纯疱疹病毒的方法，其特征在于，它由以下步骤组成：(1)将外源基因X表达盒DNA片段的两端加XbaI接头，插入重组粘粒cos56的单一XbaI位点中构成cos56-X，将cos6、cos28、cos14、cos56-X及cos48五个粘粒的组合命名为Set X；(2)将Set X经PacI酶切后共转染HSV敏感细胞，被导入的五个片段在细胞中发生同源重组而生成重组病毒HSV1-X毒种；(3)将得到的毒种进行空斑筛选和纯化，获得重组病毒HSV1-X。 |
| 摘要 | 本发明叙述了一种以含有HSV1全基因组的5个粘粒(cos6，cos28，cos14，cos56，cos48)为基础的简便而高效地产生重组单纯疱疹病毒的方法。该方法包括将外源基因表达盒插入粘粒cos56或/和cos6中HSV-1 DNA的单一XbaI位点中。将含有外源基因的粘粒与其余4个粘粒等摩尔混合，经PacI酶切后共转染对HSV-1感染敏感的细胞，通过5个HSV片段的同源重组而产生含有外源基因的重组单纯疱疹病毒。依照这种方法，产生了能表达大肠杆菌lacZ基因的单纯疱疹病毒HSV1-lacZ100。HSV1-lacZ100的特征在于，在野生型HSV1 17株的UL44基因的XbaI位点中插入了CMV-lacZ-polyA片段，插入方向不限定。HSV1-lacZ100的用途有：1)作为研究神经传导的示踪剂；2)作为抗单纯疱疹病毒药物及其它抗病毒药物的靶病毒；3)作为HSV1扩增子载体研究中的辅助病毒以更灵敏地监测辅助病毒滴度变化。 |
| 国际公布 |
