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抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法

公开(公告)号 CN1544636A  
公开(公告)日 2004.11.10  
申请(专利)号 CN200310106354.6  
申请日期 2003.11.19  
专利名称 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法  
主分类号 C12N15/53  
分类号 C12N15/53;C12P21/08;G01N33/577  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 东南大学  
发明(设计)人 谢维;金俊飞;张建琼;单军  
地址 210096江苏省南京市四牌楼2号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 南京经纬专利商标代理有限公司  
代理人 沈廉  
国省代码 江苏;32  
主权项 一种抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备方法,其特征在于采用基因重组的方法表达醛糖还原酶相似蛋白-谷胱甘肽转移酶(ARL-GST)重组蛋白并将其纯化;将醛糖还原酶相似蛋白-谷胱甘肽转移酶(ARL-GST)免疫小制备脾细胞悬液,在聚乙二醇(PEG)作用下与处于对数生长期的Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过杂交瘤抗体检测与数次克隆,得到稳定分泌抗ARL-1单克隆抗体的一株细胞。  
摘要 抗醛糖还原酶相似蛋白单克隆抗体的制备与鉴定方法,属于生物工程开发新型肝癌诊断试剂的技术领域。其制备的方法是采用基因重组的方法表达、纯化ARL-GST重组蛋白,将ARL-GST免疫小鼠制备脾细胞悬液,在聚乙二醇作用下与处于对数生长期的Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过杂交瘤抗体检测与数次克隆,得到稳定分泌抗ARL-1单克隆抗体的一株细胞,命名为F9。经测定F9分泌的抗ARL-1单克隆抗体属IgG2b亚型,轻链为κ型,其腹水效价为1∶4×10-5。经鉴定F9分泌的单克隆抗体只对ARL-1蛋白反应,而对与ARL-1蛋白具有较高同源性的醛糖还原酶都不起作用,说明上述单克隆抗体是特异性抗ARL-1蛋白的。  
国际公布  
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