公开(公告)号 | CN1563413A |
公开(公告)日 | 2005.01.12 |
申请(专利)号 | CN200410008726.6 |
申请日期 | 2004.03.16 |
专利名称 | 用基因靶标筛选具有降低血脂中胆固醇组分的方法 |
主分类号 | C12Q1/68 |
分类号 | C12Q1/68 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国科学院新疆理化技术研究所 |
发明(设计)人 | 信学雷;李维琪;陈志慧;刘云英;麦迪娜;张云峰 |
地址 | 830011新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市北京南路40号附1号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所 |
代理人 | 张莉 |
国省代码 | 新疆;65 |
主权项 | 一种用基因靶标筛选具有降低血脂中胆固醇组分的方法,其特征在于,按下例步骤进行:a、采用常规获得目的基因的方法,获得载脂蛋白ApoAI和清道夫受体SR-BI基因,并且将其作为药物筛选靶标;b、采用常规方法将载脂蛋白ApoAI和清道夫受体SR-BI基因构建酵母载体,利用酵母双杂交系统,并用报告基因和酵母交配证实相互作用的存在;c、选择酵母双杂交系,用正常的菌株或交配的二倍体菌株检验具有降低血脂中胆固醇组分的毒性,只有对酵母菌株生长影响不大时才能用于检测;d、以报告基因所表达的α、β-半乳糖苷酶定量检测了载脂蛋白ApoAI和清道夫受体SR-BI间存在相互作用强弱,定量地比较各种组分在降低血脂中胆固醇能力的差别;e、本方法不仅用于筛选化合物单体,同时也用于复方的筛选。 |
摘要 | 本发明涉及一种用基因靶标筛选具有降低血脂中胆固醇组分的方法,该方法首先从大鼠肝脏总RNA用RT-PCR方法获得了wistar大鼠的载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体(SR-BI)基因的全长cDNA,并将其克隆入酵母表达载体,利用报告基因、省却培养基、酵母交配证实了在载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体(SR-BI)间存在相互作用,以报告基因所表达的α、β-半乳糖苷酶定量检测了载脂蛋白AI(apoAI)和清道夫受体(SR-BI)间存在相互作用强弱,并运用在动物实验中证明有效的药物为阳性对照,检验了该方法,证明该方法有效,可用于在基因水平上筛选和评价具有调脂效果的关键组分。该方法成本低廉,高效准确,又可部分揭示了药物降低胆固醇的作用机理。 |
国际公布 |