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降解合成制药有机废水的特效菌株及构建方法

公开(公告)号 CN1594539A  
公开(公告)日 2005.03.16  
申请(专利)号 CN200410041125.5  
申请日期 2004.06.30  
专利名称 降解合成制药有机废水的特效菌株及构建方法  
主分类号 C12N1/00  
分类号 C12N1/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C02F3/34  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 南京大学  
发明(设计)人 程树培;张徐祥;孙石磊;魏国哲;于洪峰;张力;朱程军;万玉秋;李维新;于红霞;孙成;顾继东  
地址 210008江苏省南京市汉口路22号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 南京苏高专利事务所  
代理人 成立珍  
国省代码 江苏;32  
主权项 降解制药废水特效菌株,其特征是以亲株1白腐真菌(Phanerochaetechrysosporium),亲株2土著细菌XZ1(Bacillus),亲株3酵母(Saccharomycescerevisiae)真核细胞原生质体和原核细胞原生质体制备后融合。先制备原生质体,并经离心后收集、缓冲液清洗后获得,然后进行二次融合。第一次融合:等量的亲株1白腐真菌的原生质体与亲株2土著细菌XZ1细胞的原生质体混合、并在聚乙二醇、CaCl2、蔗糖配制的诱导液中融合,经离心后收集融合产物;第二次融合:上次得到的等量的菌落与亲株3酿酒酵母细胞的原生质体混合、在聚乙二醇、CaCl2、蔗糖配制的诱导液中融合,经离心后收集融合产物、含蔗糖高渗缓冲液离心清洗后、分别涂布于SIM1链霉素Sm培养基、SIM2制霉菌素Nt培养基、SIM3链霉素Sm+制霉菌素Nt的双抗培养基三种固体鉴别培养基上,同时能在三种培养基上长出的菌落为三亲跨界融合的保存号为CGMCC.1087的菌落。  
摘要 降解制药废水特效菌株,其构建方法是将白腐真菌(Phanerochaetechrysosporium)真核细胞、土著细菌XZ1原核细胞(Bacillus)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)真核细胞,共三个亲株菌的两界细胞的原生质体进行融合,三亲基因在同一个细胞内重组整合,构建出基因工程特效菌。本发明由双亲跨界融合和三亲跨界融合两部分组成。特效菌株含有亲株2的基因DNA片段,不同于亲株2,也不同于亲株1和亲株3。特效菌株综合了三亲株优势,利于处理降解制药废水。原生质体融合不产生新基因,不存在基因污染问题。  
国际公布  
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