公开(公告)号 | CN1676600A |
公开(公告)日 | 2005.10.05 |
申请(专利)号 | CN200510023674.4 |
申请日期 | 2005.01.28 |
专利名称 | 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用 |
主分类号 | C12N1/21 |
分类号 | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/12;C12N15/62;C12P21/02 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 华东师范大学 |
发明(设计)人 | 赖玉平;吴自荣;黄静;王林发;左翼;李骏 |
地址 | 200062上海市中山北路3663号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海德昭专利事务所 |
代理人 | 程宗德;石昭 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌,其特征在于,该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3),所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽,即DCD-1L基因的质粒pET32a(+)。 |
摘要 | 一种高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌及其构建方法和应用,属于生物工程技术领域。该基因工程菌是携带重组质粒的大肠杆菌DH5α、BL21(DE3),所述的重组质粒是含人汗腺抗菌肽,即DCD-1L基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建:根据DCD-1L的氨基酸组成,以引物的形式合成DCD-1L的两条DNA链,两条链之间有26bp互补,通过PCR扩增获得DCD-1L双链DNA,经酶切,插入质粒pET-32a(+),构建成重组质粒pET-32a-DCD-1L,转化大肠杆菌,获得高效表达重组人汗腺抗菌肽的基因工程菌。用所述的基因工程菌生产人汗腺抗菌肽的方法包括三个步骤:液体培养;纯化制得的人汗腺抗菌肽融合蛋白;和制备重组人汗腺抗菌肽。本发明的优点:生产重组人汗腺抗菌肽成本低;人汗腺抗菌肽的表达量高;纯化步骤简便,易于操作;得率高。 |
国际公布 |