| 公开(公告)号 | CN1683523A |
| 公开(公告)日 | 2005.10.19 |
| 申请(专利)号 | CN200510067523.9 |
| 申请日期 | 2005.04.18 |
| 专利名称 | 一种诱导分化人外周血单个核细胞的方法 |
| 主分类号 | C12N5/08 |
| 分类号 | C12N5/08 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 2004.9.20 CN 200410066518.1 |
| 申请(专利权)人 | 上海市第一人民医院 |
| 发明(设计)人 | 孙宝贵;李为真;戴秋艳 |
| 地址 | 200080上海市武进路85号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海正旦专利代理有限公司 |
| 代理人 | 包兆宜 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种诱导分化人外周血单个核细胞的方法，其特征在于采用分离人外周血单个核细胞后，经体外直接培养、5-氮杂胞苷诱导分化得到心肌细胞，包括下述步骤，1)分离人外周血单个核细胞：取人股动脉抗凝血10-15ml，用Ficoll密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞；2)体外培养人外周血单个核细胞：含20％FBS的DMEM培养液、培养箱37℃2、5％CO2，将人外周血单个核细胞种植于包被有明胶的培养瓶中或小玻片上；3)诱导分化人外周血单个核细胞：DMEM培养液中加入5-氮杂胞苷10μmol/L；将人外周血单个核细胞种植于包被有明胶的培养瓶中或小玻片上；4)鉴定心肌细胞标志：进行细胞形态学观察、相关蛋白的免疫细胞化学染色和相关基因的RT-PCR检测。 |
| 摘要 | 本发明属生物技术领域，涉及一种将人外周血单个核细胞诱导分化为心肌细胞的培养方法。本发明方法从人外周血分离出单个核细胞，通过体外直接培养，用5-氮杂胞苷诱导其分化为心肌细胞。本发明方法诱导后的外周血单个核细胞具有心肌细胞的部分特点，又具有干细胞的特征。本方法可最大限度利用有分化潜力的干细胞，避免成体干细胞的损失。为人外周血单个核细胞诱导分化的分离和培养建立了方法学，为此类研究奠定了基础。本发明还为诱导后的单个核细胞回输体内后进一步分化为成熟的、有功能的心肌细胞，恢复心脏功能的临床应用提供了准备。 |
| 国际公布 |
