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白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法

公开(公告)号 CN1233822C  
公开(公告)日 2005.12.28  
申请(专利)号 CN03152968.2  
申请日期 2003.09.05  
专利名称 白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法  
主分类号 C12N5/08  
分类号 C12N5/08;C12N15/79;C12N15/24;A61K38/20;A61P35/00  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国科学技术大学;山东省医学科学院基础医学研究所  
发明(设计)人 田志刚;张 建;魏海明;张建华;孙 汭  
地址 230026安徽省合肥市金寨路96号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 合肥华信专利商标事务所  
代理人 余成俊  
国省代码 安徽;34  
主权项 白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株,其特征在于保藏号为CGMCCNo.0996的NK-92/IL-15细胞株。  
摘要 本发明公开了一种白细胞介素-15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法,该细胞株表型为CD56强阳性,CD16和CD3均为阴性,其形态为分散的、半贴壁生长状态。其制备方法,是将IL-15的cDNA编码区插入pcDNA3真核表达载体,构建分泌型重组真核表达载体pcDNA3/IL-15;利用脂质体转染NK-92细胞;在筛选培养基中加入Geneticin(G418)进行筛选;有限稀释克隆化细胞,以IL-15的依赖细胞株测定克隆细胞培养上清中IL-15的活性,从中挑选出表达IL-15的阳性细胞克隆;将该克隆在20~100 活性单位的IL-15的完全α-MEM 培养基中进行扩增,得到具有临床应用价值的工程细胞株。适于临床用于过继免疫治疗肿瘤。  
国际公布  
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