公开(公告)号 | CN1724677A |
公开(公告)日 | 2006.01.25 |
申请(专利)号 | CN200510084355.4 |
申请日期 | 2005.07.19 |
专利名称 | 一种体外培养骨骼肌表达体系 |
主分类号 | C12N15/85(2006.01)I |
分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 北京市肿瘤防治研究所 |
发明(设计)人 | 张志谦;宋 琳 |
地址 | 100034北京市西城区大红罗厂街1号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京中北商标专利事务所有限公司 |
代理人 | 吴 立 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种体外培养骨骼肌表达体系,主要包括含目的基因的表达载体的构建、表达载体转染宿主细胞群及筛选、目的基因在宿主细胞中的表达和表达产物的分离纯化、表达产物的活性检测的步骤,其特征在于所述的表达载体是在pcDNA3.0基础上,构建的带有myc10检测标签及6×his纯化标签的表达载体;且在所述的表达载体中插入人基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列(见序列1)。 |
摘要 | 本发明涉及了一种体外培养骨骼肌表达体系,包括含目的基因的表达载体的构建、表达载体转染宿主细胞群及筛选、目的基因在宿主细胞中的表达和表达产物的分离纯化等步骤,其特征在于所述的表达载体是在pcDNA3.0基础上,构建的带有myc10检测标签及6×his纯化标签的表达载体;且在所述的表达载体中插入人基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列。本发明在表达载体中插入了基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列,增大了蛋白的分泌量;采用了QM7细胞作为宿主细胞表达蛋白,增大了蛋白的表达量;筛选出适合QM7细胞分化的无血清分化培养基,培养基造价低并且利于后期纯化工作,且为PEX作为重组蛋白药物进行大规模生产奠定了前期基础。 |
国际公布 |