| 公开(公告)号 | CN1273484C |
| 公开(公告)日 | 2006.09.06 |
| 申请(专利)号 | CN02125806.6 |
| 申请日期 | 2002.07.29 |
| 专利名称 | 重组人白细胞介素-1受体拮抗剂的纯化方法 |
| 主分类号 | C07K14/435(2006.01)I |
| 分类号 | C07K14/435(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 北京北医联合生物工程公司 |
| 发明(设计)人 | 马大龙;狄春辉;朱仁英;杨 璐;韩 普 |
| 地址 | 100083北京市海淀区学院路38号北京大学医学部 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京三友知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 黄 健 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 重组人白细胞介素-1受体拮抗剂的纯化方法，其特征在于，将含有目的蛋白的样品顺序进行阴离子交换液相层析和阳离子交换液相层析；其中，阴离子交换液相层析过程的层析介质为DEAEFastFlow；使用的缓冲液包括：A液：pH8.550mMTris-HCl缓冲液B液：pH6.820mMPB样品在A液中上样，上样完毕后，先以A液冲洗已载有目的蛋白的层析柱，然后采用B液进行梯度洗脱，B液的洗脱梯度为0％-80％；当B液梯度为80％时，收集洗脱峰；阳离子交换液相层析过程的层析介质为CMFastFlow；使用的缓冲液包括：A液：pH5.550mMHAc-NaAc缓冲液B液：2MNaCl以阴离子交换液相层析过程的收集组份上样，上样完毕后，先以A液冲洗已载有目的蛋白的层析柱，然后采用B液进行梯度洗脱，B液的洗脱梯度为0％-80％；当B液梯度为10％时，收集洗脱峰。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种分离纯化蛋白，尤其是重组人白细胞介素-1受体拮抗剂的方法，采用二步液相层析法，首先进行阴离子交换液相层析，然后再进行阳离子交换层析。本发明利用简单的方法替代繁琐的传统方法获得了意想不到的效果，即，只使用简单的二步液相层析法就得到了高纯度，高活性的重组人白细胞介素-1受体拮抗剂，对于其它的蛋白质纯化工艺也提供了新的思路。 |
| 国际公布 |
