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MG7-Ag模拟表位构建胃癌特异性多表位基因疫苗的方法

公开(公告)号 CN1287862C  
公开(公告)日 2006.12.06  
申请(专利)号 CN200410073125.3  
申请日期 2004.09.29  
专利名称 MG7-Ag模拟表位构建癌特异性多表位基因疫苗的方法  
主分类号 A61K48/00(2006.01)I  
分类号 A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国人民解放军第四军医大学  
发明(设计)人 吴开春;陈 瑜;宁小萱;丁 杰;樊代明  
地址 710032陕西省西安市长乐西路17号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 西安通大专利代理有限责任公司  
代理人 李郑建  
国省代码 陕西;61  
主权项 一种MG7-Ag模拟表位构建胃癌特异性多表位基因疫苗的方法,其特征在于,采用单一表位以同源串联形式,以HSP70为载体,GGGS为间隔序列,连续四次PCR,并以前一次PCR的产物作为下一次PCR的模版,将四个不同的模拟表位以及间隔序列连接起来;构建含有4个串联不同的MG7-Ag模拟表位与HSP70的融合基因疫苗,其串联表位的具体核苷酸以及基酸序列如下:K P H V H T K G G G SAAA CCA CAT CTA CAT ACA AAA GGA GGA GGA AGTK P H L H F H G G G SAAA CCA CAT CTT CAT TTT CAT GGA GGA GGA AGTK P H S H L H G G G SAAA CCA CAT AGT CAT CTT CAT GGA GGA GGA AGTS W A P V Y A R A NAGT TGG GCT CCA GTT TAT GCT AGA GCT AAT。  
摘要 本发明公开了以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础构建的多表位DNA疫苗及其方法。本发明利用HSP70为载体,GGGS为间隔序列,构建含有4个串联不同的MG7-Ag模拟表位与HSP70的融合基因疫苗。经Western blotting鉴定表明融合基因在小骨髓瘤SP2/0细胞中成功表达,并保持了亲本蛋白各自的活性。质粒免疫接种后,融合基因疫苗可诱导小鼠产生抗MG7-Ag特异性抗体以及一定数量的特异性CTL分泌IFNγ,多表位疫苗免疫组优于单表位疫苗组和其他对照组。肿瘤攻击后,疫苗免疫组小鼠成瘤体积明显小于对照组。这一基因疫苗在胃癌的免疫治疗研究,胃癌特异性疫苗的研制方面将具有巨大的潜在价值。  
国际公布  
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