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胃癌特异性纳米疫苗的制备方法

公开(公告)号 CN1287857C  
公开(公告)日 2006.12.06  
申请(专利)号 CN200410073124.9  
申请日期 2004.09.29  
专利名称 癌特异性纳米疫苗的制备方法  
主分类号 A61K39/00(2006.01)I  
分类号 A61K39/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国人民解放军第四军医大学  
发明(设计)人 吴开春;师 瑞;吴道澄;宁小萱;丁 杰;樊代明  
地址 710032陕西省西安市长乐西路17号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 西安通大专利代理有限责任公司  
代理人 李郑建  
国省代码 陕西;61  
主权项 一种胃癌特异性纳米疫苗的制备方法,其特征在于,将人工合成的胃癌特异性抗原MG7模拟表位多肽和免疫佐剂CpG ODN 1645采用纳米乳剂包封,所述的胃癌特异性抗原MG7的基酸序列为Lys Pro His Val His Thr Lys,获得胃癌特异性纳米疫苗;具体包括以下步骤:1)在2ml的双蒸水中分别加入0.4%重量的司盘-80、吐温-80;混合均匀得到水相A;2)在另一加入8.0ml双蒸水的大试管中,先加入1.6ml的大豆油,然后各加入1.6mg的胃癌特异性抗原MG7模拟表位多肽和免疫佐剂CpG ODN1645,最后加入0.4%重量的司盘-80,混合均匀,得到油相B;3)在3000转/分搅拌下,将油相B逐滴加入到水相A中,滴加完毕后将混合物移至真空高速剪切乳化机上,在0.7Kpa真空下,以23000转/分剪切40分钟,2次;4)剪切后室温冷却20分钟,得到乳白色带乳光液体,冰浴下超声3分钟后再用膜过滤、除菌后4℃保存,即得到20nm-30nm的胃癌特异性纳米疫苗。  
摘要 本发明公开了胃癌特异性纳米疫苗的制备方法。本发明利用生物性纳米乳剂作为体内药物运输载体,以胃癌特异性多肽抗原MG7为免疫抗原,以含有CpG基序的寡核甘酸(CpG ODN)为免疫佐剂,采用磁力超声法构建共包封有MG7-Ag模拟表位多肽与CpG ODN的纳米疫苗。经高效液相色谱分析,电镜观察以及离心等方法鉴定表明所构建的纳米疫苗粒径控制在20-30nm并具有较高的包封率和稳定性。疫苗免疫接种后,可诱导小产生抗MG7-Ag特异性抗体以及一定数量的特异性CTL分泌IFNγ,抗原-佐剂共包封组优于单表位抗原单独包封组和其他对照组。肿瘤攻击后,共包封疫苗免疫组小鼠成瘤体积明显小于对照组。这一基因疫苗在胃癌的免疫治疗研究,胃癌特异性疫苗的研制方面将具有巨大的潜在价值。  
国际公布  
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