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脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建

公开(公告)号 CN1320117C  
公开(公告)日 2007.06.06  
申请(专利)号 CN200510050844.8  
申请日期 2005.07.22  
专利名称 脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建  
主分类号 C12N15/62(2006.01)I  
分类号 C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 浙江大学  
发明(设计)人 赵同峰;谷 卫;詹宇红;赵江佩  
地址 310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 杭州求是专利事务所有限公司  
代理人 赵杭丽;张法高  
国省代码 浙江;33  
主权项 人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的cDNA序列,其特征是:全长共567个bp,1-15bp编码肠激酶识别序列,16-108bp编码人胰升糖素样肽-1类似肽(Glucagons-like Peptide-1Analogues,GLP-1-A),序列长93bp,其中19-21bp将人胰升糖素样肽-1(7-37)[Glucagons-like Peptide-1(7-37),GLP-1(7-37)]编码基因中编码第8位基酸丙氨酸的密码子GCT突变为甘氨酸密码子GGT,109-153bp编码接头肽DNA序列,序列长45bp,154-564bp编码脂联素,序列长411bp,565-567bp为终止密码子,该融合基因cDNA序列见SEQ ID NO 1。  
摘要 本发明公开了人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建方法。本发明运用PCR技术获得人脂联素和GLP-1-A编码基因,脂联素基因通过扩增脂联素球状域基因获得,通过将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子突变为甘氨酸密码子获得GLP-1-A编码基因,运用酶切技术,将GLP-1-A和脂联素编码基因定向克隆到表达载体,获得人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体,经转化蛋白表达细菌表达出了含肠激酶识别序列的人Adiponectin-GLP-1-A融合蛋白,本发明为进一步研究其活性,测定融合蛋白上GLP-1-A半衰期,得到能促进胰岛β细胞分泌胰岛素、能改善胰岛素抵抗、副作用小的新蛋白提供良好的前期研究。  
国际公布  
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