| 公开(公告)号 | CN1743457A |
| 公开(公告)日 | 2006.03.08 |
| 申请(专利)号 | CN200410073165.8 |
| 申请日期 | 2004.10.11 |
| 专利名称 | 人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌高表达载体和制备方法 |
| 主分类号 | C12N15/70(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 发明(设计)人 | 陈苏民;秦 云;陈南春 |
| 地址 | 710049陕西省西安市长乐西路15号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 西安通大专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 孙 枫 |
| 国省代码 | 陕西;61 |
| 主权项 | 一种人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌表达载体，其特征在于：所述的人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌表达载体是指用分子克隆技术将从人体组织cDNA文库中扩增得到人骨形成蛋白-4成熟肽的cDNA序列，再克隆重组获得的大肠杆菌表达载体pDH2-hB4m，该载体能够在大肠杆菌中高水平表达出人骨形成蛋白-4成熟肽，载体DNA全长4,014个核苷酸对，全部核苷酸序列如下： 1AGATCTCTCTCACCTACCAAACAATGCCCCCCTGCAAAAAATAAATTCATATAAAAAACA TCTAGAGAGAGTGGATGGTTTGTTACGGGGGGACGTTTTTTATTTAAGTATATTTTTTGT 61TACAGATAACCATCTGCGGTGATAAATTATCTCTGGCGGTGTTGACATAAATACCACTGG ATGTCTATTGGTAGACGCCACTATTTAATAGAGACCGCCACAACTGTATTTATGGTGACC 121CGGTGATACTGAGCACATCAGCAGGACGCACTGACCACCATGAAGGTGACGCTCTTAAAA GCCACTATGACTCGTGTAGTCGTCCTGCGTGACTGGTGGTACTTCCACTGCGAGAATTTT 181ATTAAGCCCTGAAGAAGGGCAGCATTCAAAGCAGAAGGCTTTGGGGTGTGTGATACGAAA TAATTCGGGACTTCTTCCCGTCGTAAGTTTCGTCTTCCGAAACCCCACACACTATGCTTT 241CGAAGCATTGGTTAAAAATTAAGGAGAATTCATGAAGCATCACTCACAGCGGGCCAGGAA GCTTCGTAACCAATTTTTAATTCCTCTTAAGTACTTCGTAGTGAGTGTCGCCCGGTCCTT 301GAAGAATAAGAACTGCCGGCGCCACTCGCTCTATGTGGACTTCAGCGATGTGGGCTGGAA CTTCTTATTCTTGACGGCCGCGGTGAGCGAGATACACCTGAAGTCGCTACACCCGACCTT 361TGACTGGATTGTGGCCCCACCAGGCTACCAGGCCTTCTACTGCCATGGGGACTGCCCCTT ACTGACCTAACACCGGGGTGGTCCGATGGTCCGGAAGATGACGGTACCCCTGACGGGGAA 421TCCACTGGCTGACCACCTCAACTCAACCAACCATGCCATTGTGCAGACCCTGGTCAATTC AGGTGACCGACTGGTGGAGTTGAGTTGGTTGGTACGGTAACACGTCTGGGACCAGTTAAG 481TGTCAATTCCAGTATCCCCAAAGCCTGTTGTGTGCCCACTGAACTGAGTGCCATCTCCAT ACAGTTAAGGTCATAGGGGTTTCGGACAACACACGGGTGACTTGACTCACGGTAGAGGTA 541GCTGTACCTGGATGAGTATGATAAGGTGGTACTGAAAAATTATCAGGAGATGGTAGTAGA CGACATGGACCTACTCATACTATTCCACCATGACTTTTTAATAGTCCTCTACCATCATCT 601GGGATGTGGGTGCCGCTGATAATCTAGAGTCGACCTGCAGGCATGCAAGCTTCTGTTTTG CCCTACACCCACGGCGACTATTAGATCTCAGCTGGACGTCCGTACGTTCGAAGACAAAAC 661GCGGATGAGAGAAGATTTTCAGCCTGATACAGCTTAAATCAGAACGCAGAAGCGGTCTGA CGCCTACTCTCTTCTAAAAGTCGGACTATGTCGAATTTAGTCTTGCGTCTTCGCCAGACT 721TAAAACAGAATTTGCCTCCCGGCAGTAGCGCGGTGGTCCCACCTGACCCCATGCCGAACT ATTTTGTCTTAAACGGAGGGCCGTCATCGCGCCACCAGGGTGGACTGGGGTACGGCTTGA 781CAGAAGTGAAACGCCGTAGCGCCGATGGTAGTGTGGGGTCTCCCCATGCGAGAGTAGCCA GTCTTCACTTTGCGGCATCGCGGCTACCATCACACCCCAGAGGGGTACGCTCTCATCGGT 841ACTGCCAGGCATCAAATAAAACGAAAGGCTCAGTCGAAAGACTGGGCCTTTCGTTTTATC TGACGGTCCGTAGTTTATTTTGCTTTCCGAGTCAGCTTTCTGACCCGGAAAGCAAAATAG 901TGTTGTTTGTCGGTGAACGCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAAC ACAACAAACAGCCACTTGCGAGAGGACTCATCCTGTTTAGGCGGCCCTCGCCTAAACTTG 961GTTGCGAAGCAACGGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCAT CAACGCTTCGTTGCCGGGCCTCCCACCGCCCGTCCTGCGGGCGGTATTTGACGGTCCGTA 1021CAAATTAAGCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTGT GTTTAATTCGTCTTCCGGTAGGACTGCCTACCGGAAAAACGCAAAGATGTTTGAGAAACA 1081TTATTTTTCTAAATACATTCAAATATGTATCCGCTCATGAGACAATAACCCTGATAAATG AATAAAAAGATTTATGTAAGTTTATACATAGGCGAGTACTCTGTTATTGGGACTATTTAC 1141CTTCAATAATATTGAAAAAGGAAGAGTATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCGCCCTTATT GAAGTTATTATAACTTTTTCCTTCTCATACTCATAAGTTGTAAAGGCACAGCGGGAATAA 1201CCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAACGCTGGTGAAAGTA GGGAAAAAACGCCGTAAAACGGAAGGACAAAAACGAGTGGGTCTTTGCGACCACTTTCAT 1261AAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATCGAACTGGATCTCAACAGC TTTCTACGACTTCTAGTCAACCCACGTGCTCACCCAATGTAGCTTGACCTAGAGTTGTCG 1321GGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGCACTTTTAAA CCATTCTAGGAACTCTCAAAAGCGGGGCTTCTTGCAAAAGGTTACTACTCGTGAAAATTT 1381GTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTATTGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGC CAAGACGATACACCGCGCCATAATAGGGCATAACTGCGGCCCGTTCTCGTTGAGCCAGCG 1441CGCATACACTATTCTCAGAATGACTTGGTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTT GCGTATGTGATAAGAGTCTTACTGAACCAACTCATGAGTGGTCAGTGTCTTTTCGTAGAA 1501ACGGATGGCATGACAGTAAGAGAATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACT TGCCTACCGTACTGTCATTCTCTTAATACGTCACGACGGTATTGGTACTCACTATTGTGA 1561GCGGCCAACTTACTTCTGACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCAC CGCCGGTTGAATGAAGACTGTTGCTAGCCTCCTGGCTTCCTCGATTGGCGAAAAAACGTG 1621AACATGGGGGATCATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATA TTGTACCCCCTAGTACATTGAGCGGAACTAGCAACCCTTGGCCTCGACTTACTTCGG |
| 摘要 | 本发明涉及人骨形成蛋白-4成熟肽的大肠杆菌表达载体及其所表达的人骨形成蛋白4成熟肽的制备方法。所述的载体是指用分子克隆技术重组获得的大肠杆菌表达载体pDH2-hB4m，载体全长4,014个核苷酸对；所述利用表达载体pDH2-hB4m制备具有生物学活性人骨形成蛋白-4成熟肽的方法，包括宿主菌转化表达、培养、纯化、复性、活性鉴定步骤。本发明所提供的大肠杆菌高表达载体和用该载体转化宿主菌表达人骨形成蛋白-4成熟肽的制备方法，可以作为新的基因工程产品及其方法推向临床治疗、诊断和科学研究应用，并推向市场。 |
| 国际公布 |
