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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:突变型p53基因反义表达载体及其制备方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

突变型p53基因反义表达载体及其制备方法

公开(公告)号 CN1796562A  
公开(公告)日 2006.07.05  
申请(专利)号 CN200410094011.7  
申请日期 2004.12.24  
专利名称 突变型p53基因反义表达载体及其制备方法  
主分类号 C12N15/63(2006.01)I  
分类号 C12N15/63(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 天津医科大学附属肿瘤医院  
发明(设计)人 付 丽;许少峰;张 斌;张媛媛;冯玉海  
地址 300060天津市河西区体院北环湖西路天津医科大学附属肿瘤医院  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 天津市宗欣专利商标代理有限公司  
代理人 董光仁  
国省代码 天津;12  
主权项 一种突变型p53基因反义表达载体,其特征在于该载体上连接有突变的p53外显子8基因序列: GAATTCGCTTTGAGGTGCGTGTTTGTGCCTGTCCTGGGAAAGACCGGCGC ACAGAGGAAGGAGGTCTCCGCAAGAAAGGGGAGCCTCACCACTGCAGGCA TGCAAGGCT; 并由此载体能够转录出与此突变点特异性结合的互补反义RNA,从而阻断突变p53信号的表达。  
摘要 本发明公开了一种突变型p53基因反义表达载体及其制备方法,属于基因工程技术。本发明载体上连接有突变的p53外显子8基因序列,并能够转录出与此突变点特异性结合的互补反义RNA,从而阻断突变p53信号的表达;其制备方法是采用免疫组化筛选突变型p53细胞系、PCR-SSCP法及基因测序确定突变的p53外显子和基因序列,把含有突变位点的p53外显子8序列插入pGEM3zf(+/-)质粒载体的多克隆位点处,构建pGEM3zf(+/-)p53exon8’重组载体。这样制备的反义RNA被直接导入研究细胞内,因为是直接导入反义RNA本身,所导入的RNA分子量小,较易进入细胞内,操作简单;由于体外转录系统能合成较多量的产物,可随时重复操作,满足需要的RNA量。  
国际公布  
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