公开(公告)号 | CN1837243A |
公开(公告)日 | 2006.09.27 |
申请(专利)号 | CN200510110082.6 |
申请日期 | 2005.11.07 |
专利名称 | 海螵蛸多糖CPS-1及其制备方法和用途 |
主分类号 | C08B37/00(2006.01)I |
分类号 | C08B37/00(2006.01)I;A61K31/715(2006.01)I;A61P1/04(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国人民解放军军第二军医大学 |
发明(设计)人 | 张建鹏;冯伟华;焦炳华;刘军华;魏江洲;王 俊;徐红丽 |
地址 | 200433上海市杨浦区翔殷路800号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海新天专利代理有限公司 |
代理人 | 衷诚宣 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 海螵蛸多糖CPS-1的制备方法,步骤如下: (1)制备水提取物溶液:将海螵蛸固体粉碎成粉末,加水煮沸8-10小时,趁热抽滤得到滤液,将滤液浓缩,离心弃沉淀;上清液用氯仿与正丁醇的体积比为4∶1的sevage法萃取多次除蛋白,至水相不含蛋白质,得到水提取物溶液; (2)制备海螵蛸多糖粗品:将上述提取物溶液加乙醇沉淀过夜,离心弃上清,将沉淀复溶于蒸馏水,离心去不溶物,将上清再次醇沉,离心去上清;沉淀加蒸馏水溶解,流水透析至少36小时;将透析液冷冻干燥,得海螵蛸多糖粗品; (3)分离纯化,制备海螵蛸多糖CPS-1:将所得海螵蛸多糖粗品热水浴中溶于蒸馏水,离心收集上清,将不溶物再次热水浴中溶于蒸馏水,离心弃沉淀,将两次上清液合并,上样于DEAESepharoseF.F离子交换柱,依次用蒸馏水、0.3mol/L氯化钠溶液进行洗脱,并用自动部分收集仪将洗脱液依次收集于试管中;使用体积比5∶1的硫酸-苯酚法分别对各个试管中的洗脱液取样进行显色反应,然后用分光光度计测480nm处OD值;依次以管号为横坐标,OD值为纵坐标,作洗脱曲线;根据洗脱曲线,将氯化钠溶液洗脱峰部位的洗脱液合并并且浓缩之,流水透析至少36小时,冷冻干燥,得淡黄色固体;将淡黄色固体复溶于蒸馏水,用同样方法依次上样于SephacrylS-300分子凝胶柱和SepharoseCL-6B凝胶柱进行分离纯化,合并洗脱峰部位的洗脱液,然后取样用HPLC检测纯度,观察电脑生成的洗脱曲线,若为单一对称峰,表明纯度好,如果不是单一对称峰,则将洗脱液浓缩后,再次用SephacrylS-300分子凝胶柱和SepharoseCL-6B凝胶柱进行分离纯化,直到HPLC的洗脱曲线为单一对称峰;再将该洗脱液浓缩后冷冻干燥,即得本发明海螵蛸多糖CPS-1。 |
摘要 | 本发明涉及医药技术领域,是从海螵蛸中提取的多糖CPS-1及其制备方法和用途。制法为:将海螵蛸粉末水煮得提取液;将提取液醇沉,透析,冷冻干燥,得海螵蛸多糖粗品;再依次用DEAESepharose F.F离子交换柱、Sephacryl S-300分子凝胶柱、Sepharose CL-6B凝胶柱分离纯化,得本发明海螵蛸多糖CPS-1。经动物实验,本发明多糖CPS-1具有治疗溃疡性结肠炎的作用,因此可用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物。 |
国际公布 |