公开(公告)号 | CN1843510A |
公开(公告)日 | 2006.10.11 |
申请(专利)号 | CN200510016689.8 |
申请日期 | 2005.04.06 |
专利名称 | 毛形属线虫疫苗的制备方法及医用用途 |
主分类号 | A61K48/00(2006.01)I |
分类号 | A61K48/00(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I;A61P33/14(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 张西臣 |
发明(设计)人 | 张西臣;李建华;王静敏;宫鹏涛 |
地址 | 130062吉林省长春市西安大路175号军需大学 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 |
代理人 | 陈宏伟 |
国省代码 | 吉林;22 |
主权项 | 毛形属线虫疫苗的制备方法,包括以下步骤: 首先获得纯净的毛形属线虫,然后提取RNA,分离纯化mRNA,合成cDNA第一条链及cDNA第二条链,将cDNA与ECORI适配子连接并对连接产物磷酸化,后分离cDNA片段,并与λZAP载体连接,进行噬菌体包装,测定所构建cDNA文库滴度及重组率后进行文库扩增,提取λ噬菌体DNA,并进行cDNA文库插入片段检测,获得毛形属线虫cDNA文库;利用抗体或探针筛选功能性抗原基因,将筛选的功能性基因与真核基因表达载体连接,构建重组质粒,获得毛形属线虫核酸疫苗。 |
摘要 | 本发明提供一种毛形属线虫疫苗,包括其核酸疫苗及基因工程苗的制备方法:将毛形属线虫RNA提取,分离纯化,合成cDNA第一条链及第二条链,将cDNA与ECORI适配子连接并对连接产物磷酸化,后分离cDNA片段,并与λZAP载体连接,进行噬菌体包装,提取λ噬菌体DNA,并进行cDNA文库插入片段检测,获得毛形属线虫cDNA表达文库。将筛选的功能性基因与真核基因表达载体连接,构建重组质粒,制备毛形属线虫核酸疫苗:将功能性抗原基因与原核表达载体连接,转化DH5α菌,转化大肠杆菌,进行高效表达,获得毛形属线虫基因工程疫苗。本发明产品可用于肿瘤疾病,性功能低下等免疫功能低下或缺陷引起疾病的预防和治疗。 |
国际公布 |