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通过大肠杆菌发酵大规模生产质粒DNA的方法

公开(公告)号 CN1914330A  
公开(公告)日 2007.02.14  
申请(专利)号 CN200580004020.5  
申请日期 2005.01.31  
专利名称 通过大肠杆菌发酵大规模生产质粒DNA的方法  
主分类号 C12P19/34(2006.01)I  
分类号 C12P19/34(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权 2004.2.4 US 60/541,894  
申请(专利权)人 默克公司  
发明(设计)人 M·沙特赖因;L·K·本特利;B·A·克鲁莱维茨;K·M·利斯特纳;孙文骏;李灿容  
地址 美国新泽西州  
颁证日  
国际申请 2005-01-31 PCT/US2005/002911  
进入国家日期 2006.08.03  
专利代理机构 中国专利代理(香港)有限公司  
代理人 权陆军;黄可峻  
国省代码 美国;US  
主权项 生产质粒DNA的方法,其包含: (a)选择携带DNA质粒的大肠杆菌菌株的高产克隆亚型,其中与相同菌株的非选择的、转化的大肠杆菌克隆亚型相比,高产克隆亚型能表现出更高的每个细胞的质粒拷贝数;和, (b)在化学成分确定的培养基中,通过补料分批发酵,培养所述高产克隆亚型。  
摘要 本发明总体上涉及增加质粒DNA生产的产量的方法。该方法包括下述步骤:选择携带DNA质粒的大肠杆菌菌株(包括但不限于DH5菌株)的高产克隆亚型,并在化学成分确定的培养基中,通过补料分批发酵培养所述克隆亚型。当以工业规模培养所述高产克隆亚型时,本文所述的质粒DNA生产方法可以产生最高记录量的质粒DNA。公开的方法可以用于生产药物级DNA,以用于多核苷酸疫苗接种和基因治疗治疗方案中。  
国际公布 2005-08-25 WO2005/078115 英  
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