| 公开(公告)号 | CN1304565C |
| 公开(公告)日 | 2007.03.14 |
| 申请(专利)号 | CN200310113089.4 |
| 申请日期 | 2003.12.26 |
| 专利名称 | 一种用稀土元素促进新疆紫草愈伤组织生长的方法 |
| 主分类号 | C12N5/04(2006.01)I |
| 分类号 | C12N5/04(2006.01)I;A01H4/00(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院过程工程研究所 |
| 发明(设计)人 | 王玉春;葛 锋;王晓东 |
| 地址 | 100080北京市海淀区中关村北二条1号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 王凤华 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种使用稀土元素促进新疆紫草愈伤组织生长的方法，其特征在于，步骤如下： 1)诱导新疆紫草愈伤组织 将新疆紫草的外植体接种于含有植物激素的改良N6固体培养基I中进行诱导培育，10-30天后长出新疆紫草愈伤组织； 所述的改良N6固体培养基I的组分和含量为：每1L的N6固体培养基中含有0.1-0.7mg的萘乙酸、0.1-0.7mg的2，4-二氯苯氧乙酸和0.5-4.0mg的激动素； 2)将步骤1)诱导培育获得的新疆紫草愈伤组织置于改良N6固体培养基II中进行继代生长2-3个周期，每个周期的培养时间为10-30天； 所述的改良N6固体培养基II的组分和含量为：每1L的N6固体培养基中含有0.5-5mg/L激动素； 3)筛选高产紫草素及其衍生物的新疆紫草愈伤组织 将步骤2)中继代生长2-3个周期的新疆紫草愈伤组织转接到合成培养基III上，在24-26℃温度和无光条件下培养16-25天后，测定并选出其紫草素及其衍生物含量比天然新疆紫草药材含量高出1倍的新疆紫草愈伤组织细胞系； 所述的合成培养基III的配方为：KNO3680mg/L；NaH2PO4·2H2O 19mg/L；NaSO41917mg/L；CuCl2·2H2O0.1364mg/L；H3BO31.6mg/L；FeSO4·7H2O 1.1mg/L；NaEDTA·2H2O1.5mg/L；激动素0.5mg/L；肌醇100mg/L；蔗糖50g/L；琼脂6g/L； 4)将步骤3)得到的新疆紫草愈伤组织细胞系置于步骤2)中所述的改良N6固体培养基II中进行10-25天的预培养； 5)将步骤4)中经预培养的新疆紫草愈伤组织细胞系转入含有稀土元素Nd或混合稀土的改良N6固体培养基IV中，培养10-30天； 所述的改良N6固体培养基IV中Nd或混合稀土含量为：每1L的N6固体培养基中Nd或混合稀土含量为0.01-0.5mmol；所述混合稀土的成分和含量为：71.5％La2O3+25.9％CeO2+2.4％Pr6O11+0.2％Sm2O3，w/w。 |
| 摘要 | 本发明涉及使用稀土元素促进新疆紫草愈伤组织生长的方法：首先从新疆紫草外植体诱导出愈伤组织，愈伤组织继代若干次后，选出紫草素及其衍生物高产细胞系，通过将不同种类和不同浓度的稀土元素添加到固体培养基上，使新疆紫草的愈伤组织快速增殖，从而建立了从外植体出发，快速获得大量优质新疆紫草愈伤组织的培养体系，为实现工业规模生产紫草素及其衍生物奠定了基础。 |
| 国际公布 |
