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从胸、腹水中提取游离mRNA的方法

公开(公告)号 CN1952176A  
公开(公告)日 2007.04.25  
申请(专利)号 CN200610096455.3  
申请日期 2006.09.27  
专利名称 从胸、腹水中提取游离mRNA的方法  
主分类号 C12Q1/68(2006.01)I  
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C07H21/02(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 南京大学医学院附属鼓楼医院  
发明(设计)人 刘宝瑞;王立峰;钱晓萍  
地址 210008江苏省南京市中山路321号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 南京中新达专利代理有限公司  
代理人  
国省代码 江苏;32  
主权项 从胸、腹水中提取游离mRNA的方法,其步骤在于: (1)将胸水或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中; (2)上离心机离心,吸取上清至新管,再离心,吸取三分之二上清至新管; (3)取上清加入到Trizol LS溶液中,室温震荡; (4)向其中加入氯仿,剧烈震荡后室温下放置; (5)上离心机离心,吸取水相层至新管; (6)加入异丙醇,沉淀RNA; (7)上离心机离心,75%乙醇洗涤后晾干; (8)加入无RNA酶水,溶解RNA,以其为模板,常规技术反转录为cDNA保存。  
摘要 本发明涉及一种从胸、腹水中提取游离mRNA的方法。本发明将胸或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中,离心,吸取上清,再离心,再吸取上清,上清加入到Trizol LS溶液中,室温震荡,加入氯仿,剧烈震荡后室温下放置,离心,吸取水相层至新管,加入异丙醇,沉淀RNA,离心,75%乙醇洗涤后晾干,加入无RNA酶水,溶解RNA,以其为模板,常规技术反转录为cDNA保存。解决了过去无法从胸、腹水中抽提RNA的缺陷,可以对肿瘤及其他疾病进行早期诊治。操作方便,重复性强。  
国际公布  
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