| 公开(公告)号 | CN1320120C |
| 公开(公告)日 | 2007.06.06 |
| 申请(专利)号 | CN200510037759.8 |
| 申请日期 | 2005.01.31 |
| 专利名称 | 制备转基因家蚕的方法及其制药用途 |
| 主分类号 | C12N15/85(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A01K67/04(2006.01)I;A61K35/64(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 苏州大学;西南农业大学 |
| 发明(设计)人 | 贡成良;曹广力;薛仁宇;何 泽;魏育红;朱越雄;沈卫德;夏庆友;周泽扬;向仲怀 |
| 地址 | 215006江苏省苏州市沧浪区十梓街1号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 苏州创元专利商标事务所有限公司 |
| 代理人 | 陶海锋 |
| 国省代码 | 江苏;32 |
| 主权项 | 一种制备带有人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)的转基因家蚕的方法，其特征在于：通过基因工程操作将家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的IE-1基因启动子控制下的hGM-CSF基因克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体，构建重组转基因载体，在辅助质粒作用下，用精子介导法获得带有报告基因的家蚕，检测到hGM-CSF基因的为荧光蚕，G0代荧光蚕与正常蚕交配后代为G1代，G1代同一蛾圈孵化后单独饲养，用便携式荧光灯结合荧光倒置显微镜检测G1代家蚕幼虫，结合PCR检测，将既有明显荧光显示，又能PCR检测到hGM-CSF基因的同一蛾圈孵化后饲养的G1代转基因家蚕进行杂交育种，获得G2代，用以上从G1代获得G2代的方法，将G2代育种制备为G3代，对G2、G3代同样进行荧光检测和PCR检测，保留从G2代到G3代不发生性状分离的G3代，对保留的G3代的同一蛾圈蚕种与正常蚕进行单对杂交，同一蛾圈蚕种的杂交后代如果均不发生性状分离时，该蛾圈蚕种即为所需转基因家蚕。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种制备带有人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子的转基因家蚕的方法，通过基因工程操作将家蚕核型多角体病毒基因启动子控制下的人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子基因克隆进以转座子piggyBAC因子为基础的带有报告基因的载体，构建重组转基因载体，在轴助质粒作用下，用精子介导法获得带有报告基因的家蚕，并检测到人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子基因，育种制成所述转基因家蚕。利用该转基因家蚕的幼虫或蛹或蛾经冷冻干燥后可获得生白细胞药物。本发明方法实现转基因家蚕制备生白细胞药物，生产成本低，不涉及具有潜在危害的病毒基因组，安全性高，药物效果尤其是口服效果良好，具有十分重大的实施价值。 |
| 国际公布 |
