| 公开(公告)号 | CN1322126C |
| 公开(公告)日 | 2007.06.20 |
| 申请(专利)号 | CN99804195.5 |
| 申请日期 | 1999.02.04 |
| 专利名称 | 免疫原性降低和/或清除率降低的葡激酶衍生物的鉴定、生产和应用 |
| 主分类号 | C12N15/31(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/31(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | 1998.2.4 EP 98200323.8;1998.2.6 EP 98200365.9 |
| 申请(专利权)人 | 思罗姆-X股份有限公司;德西雷·何塞·科伦 |
| 发明(设计)人 | 德西雷·何塞·科伦 |
| 地址 | 比利时勒芬 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | 1999-02-04 PCT/EP1999/000748 |
| 进入国家日期 | 2000.09.19 |
| 专利代理机构 | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 |
| 代理人 | 樊卫民 |
| 国省代码 | 比利时;BE |
| 主权项 | 具有基本上如图1所示的氨基酸序列的葡激酶衍生物，其特征在于所述衍生物具有至少氨基酸K130T和K135R的替换，且所述衍生物选自： SakSTAR(K130T，K135R)， SakSTAR(G36R，K130T，K135R)， SakSTAR(K74R，K130T，K135R)， SakSTAR(K74Q，K130T，K135R)， SakSTAR(G36R，K74R，K130T，K135R)， SakSTAR(G36R，K74Q，K130T，K135R)， SakSTAR(G36R，H43R，K74R，K130T，K135R)， SakSTAR(E65A，K74Q，K130T，K135R)， SakSTAR(E65Q，K74Q，K130T，K135R)， SakSTAR(K74Q，K86A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65Q，T71S，K74Q，K130T，K135R)， SakSTAR(E65Q，K74Q，E108A，K109A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65Q，K74Q，K121A，K130T，K135R)， SakSTAR(E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(K35A，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65D，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65S，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(S34G，G36R，K74R，K130T，K135R)， SakSTAR(E65A，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65N，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65Q，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(K57A，E58A，E61A，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65D，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65Q，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(K35A，E65D，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)， SakSTAR(K74R，E80A，D82A，S103A，K130T，K135R)， SakSTAR(E65D，K74R，E80A，D82A，K109A，K130T，K135R)， SakSTAR(K35A，E65Q，K74R，E80A，D82A，T90A，E99D，T101S，E108A，K109A，K130T，K135R)。 |
| 摘要 | 鉴定、生产和应用葡激酶衍生物的方法，其特征在于在对患者施用后免疫原性降低，并且能通过单次静脉内大剂量注射施用。本发明的衍生物的获得方法包括，制备至少包含提供生物活性的葡激酶编码序列部分的DNA片段；对该DNA片段进行体外定点诱变，以将野生型氨基酸的一个或多个密码子替换为另一种氨基酸的密码子；在适当的载体中克隆突变的DNA片段；用该载体转化或转染适当的宿主细胞；在适于表达该DNA片段的条件下培养该宿主细胞。将表达的葡激酶衍生物纯化为均一的，并用硫醇基定点的聚乙二醇化学修饰置换的Cys；该DNA片段优选地是质粒pMEX602sakB(pMEX.sakSTAR)的453bp EcoRI-HindIII片段，通过剪接重叠延伸聚合酶链反应进行体外定点诱变，并在大肠杆菌株TG1或WK6中表达突变的DNA片段。本发明也涉及包含至少一种根据本发明的葡激酶衍生物与适当赋形剂的药用组合物，用于动脉血栓形成的治疗。 |
| 国际公布 | 1999-08-12 WO1999/040198 英 |
