金银花药材-绿原酸,当药苷,忍冬苷的含量测定方法-HPLC

仪器    Ahilent-1100高效液相色谱仪：包括四元泵，自动进样器，柱温箱，DAD二级管阵列监测器，Agilent chemstation

    试剂    当药苷，忍冬苷对照品为本所自制，经光谱分析和HPLC面积归一化法测定纯度均在99 %

色谱条件    色谱柱：YMC-Pack ODS-A-C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈（A)-1 %冰醋酸水溶液（B)；梯度：0 min（5 %A)→13 min（10%A)→30 min（25 %A)；流速：1.0 mL/min；检测波长：0~17min，用325 nm检测绿原酸；17~22min，用237 nm检测当药苷；22~25 min用245 nm检测忍冬苷；柱温：20 ℃ 

对照品溶液制备  精密称取对照品绿原酸，当药苷，忍冬苷各10 mg，分别置20 mL量瓶中，加水定容，制成0.5 mg/mL的对照品贮备液。

供试品溶液制备  精密称取药材粉末（过40目筛)1 g置于100 mL圆底烧瓶中，精密加水50 mL，称重，加热回流1 h，放冷后再称重并用水补足重量差，滤过，弃去初滤液，取续滤液用0.45 μm滤膜过滤，即得。

分别精密吸取绿原酸，当药苷，忍冬苷对照液以及金银花供试品溶液各15 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算绿原酸，当药苷，忍冬苷含量。