癃清片－盐酸小檗碱的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定癃清片中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中成药癃清片。

供试品细粉用稀乙醇提取，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长270nm处检测盐酸小檗碱的峰面积，计算出其含量。

1.乙腈

2.稀乙醇 取乙醇529mL, 加水稀释至1000mL

3.磷酸二氢钾溶液, 0.05mol/L

4.磷酸

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4200。

1.3紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3) = 30 70

2.2 检测波长：270nm

2.3 柱温：室温

1.称取供试品

取本品20片，精密称定，求出每片重量，研细，精密称取约0.1g，为供试品。

2.对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用稀乙醇溶解，制成每1mL含0.025mg的溶液。

3.供试品溶液的制备

供试品置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜（0.45mm)滤过，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长270nm处测定盐酸小檗碱（C₂₀H₁₇NO₄ · HCl)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p657。