银杏叶片－萜类内酯的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定银杏叶片中萜类内酯的含量。

本方法适用于中成药银杏叶片。

本品粉末加甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液回收甲醇，残渣加水溶解，用乙酸乙酯提取数次，回收乙酸乙酯提取液，残渣加甲醇溶解、定容，摇匀，溶液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用蒸发光散射检测器，计算含量。

1. 甲醇

2. 正丙醇

3. 四氢呋喃

1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按白果内酯峰计算应不低于2500。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：正丙醇 四氢呋喃 水＝1 15 84

2.2柱温：室温

1. 称取供试品

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于萜类内酯19.2mg的粉末，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量，加甲醇制成每1mL各含1mg、1mg、1mg、0.5mg的混合溶液。或取已标示白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C含量的银杏叶对照提取物0.15g，精密称定，加水10mL，照供试品溶液的制备方法，自‘置水浴中温热使溶散’起，同法制成对照提取物溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约相当于萜类内酯19.2mg的粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz)20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液20 mL，回收甲醇，残渣加水10 mL，置水浴中温热使溶散，加2%盐酸溶液2滴，用乙酸乙酯振摇提取4次（15 mL，10 mL，10 mL，10 mL)合并提取液，用5%醋酸钠溶液20 mL洗涤，分取醋酸钠液，用乙酸乙酯10 mL洗涤，合并乙酸乙酯提取液及洗液，用水洗涤2次，每次20 mL，合并水液，用乙酸乙酯10 mL洗涤，合并乙酸乙酯液，回收至干，残渣用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液（或对照提取物溶液)5mL、20mL和供试品溶液20mL，注入高效液相色谱仪，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p597。