风湿马钱片－示的宁的测定－薄层扫描法

本方法采用薄层扫描法测定风湿马钱片中示的宁的含量。

本方法适用于中成药风湿马钱片。

供试品加入浓氨试液、三氯甲烷摇匀，静置，补重，滤过，制成供试液，点样、展开，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λs=254nm，λ_R=300nm测量示的宁（C₂₁H₂₂N₂0₂)吸收度积分值，计算其含量。

1. 甲苯

2 .丙酮

3 .乙醇

4.三氯甲烷

5.浓氨试液

1 仪器

1.1薄层扫描仪

1.3涂布器

应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

1.4点样器

一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

1.5展开室

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

2.2吸附剂

硅胶GF₂₅₄，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。

1. 对照品溶液的制备

精密称取示的宁对照品适量，加三氯甲烷制成每1mL含0.15mg的溶液，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取本品20片，除去糖衣，精密称定，研细，取适量（约相当于3片的重量)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入浓氨试液1 mL、三氯甲烷25 mL，密塞，轻轻摇匀，称定重量，静置24小时，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，充分振摇，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.薄层板制备

将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。

2.点样

精密吸取供试品溶液 10μL、对照品溶液 5μL与10μL，分别交叉点于同一硅胶G F₂₅₄薄层板上，使成条状。如用点样器点样到薄层板上，点成条状，点样基线距底边1.0～1.5cm，条间距离可视扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.展开

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以甲苯－丙酮－乙醇－浓氨试液（4：5：0.6：0.4)为展开剂，展开，取出，晾干。

4.含量测定

示的宁（C₂₁H₂₂N₂0₂)

在105加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，进行扫描，波长：λs=254nm，λ_R=300nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编、化学工业出版社，2005年版，一部p.394。