清胃黄连丸—小檗碱、掌叶防己碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用反相高效液相色谱法测定清胃黄连丸中小檗碱、掌叶防己碱的含量。

本方法适用于中成药清胃黄连丸。

供试品加甲醇进行超声提取，滤过，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长345nm处检测小檗碱、掌叶防己碱的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 乙腈 （色谱纯)

3. 0.8％KH₂PO₄

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

YWG C₁₈柱 (150 × 4.6mm，5μm)

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 0.8％KH₂PO₄ ＝ 1 1

2.2 检测波长：345nm

2.3 柱温：28℃

1. 称取供试品

精密称取成药粉末约1.0g，每个批号取5份。

2. 对照品溶液的制备

分别精密称取小檗碱、掌叶防己碱对照品约10mL于100mL的容量瓶中，用甲醇定容，作为对照品溶液。

3.标准溶液的制备

精密吸取上述对照品液20、40、60、80、100、120μL，分别合并于5只2mL的量瓶中，用甲醇定容后，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置锥形瓶中，加甲醇15mL超声提取20min后离心10min(3000r/min)，过滤。重复上述操作4次，合并滤液，甲醇定容至50mL，用0.4μm微孔滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线的绘制

精密量取上述标准溶液20μL，进入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定小檗碱、掌叶防己碱的吸收值，以峰面积积分值对标准溶液浓度绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2.供试品的测定

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长345nm处测定小檗碱、掌叶防己碱的吸收值，计算出其含量。

李嵘、罗兰、王建春. RP－HPLC法测定清胃黄连丸中小檗碱、掌叶防己碱的含量. 海南医学，1998，第4期：293-294.