吴绍辉、谭晓梅、罗佳波等. 高效液相色谱法测定葛根芩连微丸中葛根素的含量. 中国实验

本方法采用高效液相色谱法测定葛根芩连微丸中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀的含量。

本方法适用于葛根芩连微丸中盐酸小檗碱、盐酸巴马汀的含量测定。

供试品加入甲醇超声提取，滤过，滤液进入中性氧化铝柱，洗脱液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长345nm处检测小檗碱、巴马汀的吸收值，计算出其含量。

1. 0.2％三乙胺溶液

2. 乙腈

3. 0.02％磷酸二氢钾溶液

4. 0.01％十二烷基磺酸钠溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

YWG－C₁₈柱（300 × 4.6mm, 10μm)

1.3 紫外检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：

(0.2％三乙胺/0.02％磷酸二氢钾/0.01％ 二烷基磺酸钠) 乙腈 ＝ 55 ＋ 45

2.2 检测波长：345nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品细粉（过五号筛-80目)约2g。

2. 对照品溶液的制备

分别精密称取在105°C干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品10mg、盐酸巴马汀对照品5mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1mL置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

取供试品于三角烧瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声提取30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液5mL，置已处理好的中性氧化铝柱(玻璃柱内径10mm，中性氧化铝5g，湿法装柱，用30mL乙醇预洗)上，用乙醇30mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线绘制

精密吸取对照品溶液6、8、10、14、16、20μL，进入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定小檗碱、巴马汀的吸收值，以峰面积积分值对对照品溶液进样量绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2.供试品的测定

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长345nm处测定小檗碱、巴马汀的吸收值，计算出其含量。

朱斌. 葛根芩连微丸中小檗碱、巴马汀的含量测定. 中药材，2000，23（10)：641-642.