方法名称： |
黄连上清丸—黄芩甙的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定黄连上清丸中黄芩甙的含量。 本方法适用于中成药黄连上清丸。 |
方法原理： |
将供试品加甲醇超声提取，加水定容，离心，取上清液即为供试品液。精密吸取供试品液20µL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长275nm处检测黄芩甙吸收值，以外标法计算含量。 |
试剂： |
1. 甲醇（色谱纯) 2. 醋酸铵 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Shim-Pack CLC-ODS 柱 (150 × 6mm)。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相：甲醇 醋酸铵 = 40 60 2.2 流速：1mL/min 2.3 检测波长：275nm 2.4 柱温：室温
|
试样制备： |
1. 称取供试品 精密称取本品粉末(过40目筛) 0.1g。 2. 对照品溶液的制备 准确称取黄芩甙10mg，置10mL容量瓶中，加少量甲醇溶解后，加水至刻度，作为对照品储备液。 3. 标准溶液的制备 将对照品储备液稀释成每1µL含0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg黄芩甙的溶液，作为绘制标准曲线的系列浓度标淮溶液。 4. 供试品溶液的制备 将供试品置100mL容量瓶中，加45％甲醇30mL超声提取1h，用水定容至100mL，混匀，取适量置离心管中，15000r/min．离心5min，取上清液作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 精密吸取上述标准溶液20µL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长275nm处测定黄芩甙的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 2.供试品的测定 精密吸取供试品液20µL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长275nm处测定黄芩甙的吸收值，用外标法计算出其含量。 |
参考文献： |
曹玮,石跃玲. HPLC法测定黄连上清丸中黄芩甙的含量. 云南中医中药杂志，1999，19(6)：29-30. |
