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MTT实验结果显示，当粉防己碱的浓度在10μmol/L以上时，对HeLa细胞的生长具有抑制作用，且随着浓度和时间的增加，抑制率逐渐增高，具有时间、浓度依赖性。随着浓度的增加，作用24h后，抑制率增加明显，24h IC50为17μmol/L。而作用48h后，各浓度抑制率均达60%以上。至作用72h，各浓度抑制率已达90%以上(P<0.05，图1)。
2.2 流式细胞术检测粉防己碱诱导各组细胞的凋亡情况
结果显示，用0μmol/L、15μmol/L粉防己碱处理细胞24h后，处理组细胞凋亡率为(51.8±0.97)%，明显高于对照组凋亡率[(24.3±1.23)%](P<0.05，图2)。
2.3 AnnexinV/PI双染法激光共聚焦显微镜观察细胞形态学的变化
未加粉防己碱的空白对照组细胞AnnexinV和PI均为低染;处理组(15μmol/L)作用24h后出现AnnexinV和PI多为高染的中、晚期凋亡细胞。说明粉防己碱对HeLa细胞具有诱导其凋亡的作用。与流式细胞仪检测结果基本一致(图3)。
3 讨 论
宫颈癌是世界范围内女性第二大恶性肿瘤，占所有肿瘤的10%。传统的宫颈癌治疗模式与分期密切相关，Ⅰ期、ⅡA期以手术为主，辅以放疗，ⅡB期以上以放疗为主，辅以手术和化疗。近年来,随着肿瘤化学治疗的基础与临床研究的迅速发展，化疗药物的不断开发及给药途径和方法的改进，以顺铂(DDP)为核心的联合化疗及放化疗在宫颈癌治疗中取得了一定疗效，然而化疗与放疗均有严重的副作用。因此，寻找副作用小同时对肿瘤又有较好的抑制作用的药物成为目前研究的一个热点。
许多研究证明，粉防己碱在肿瘤细胞和动物模型中都具有抗癌作用。其用于肿瘤治疗主要包括以下几方面：①直接抗肿瘤作用。通过激活凋亡相关基因，诱导肿瘤细胞凋亡或通过影响细胞周期进程，发挥直接抗肿瘤作用。大量研究证明，粉防己碱可以使许多细胞如U937、HL60、A549、HepG2和T细胞发生G1期阻滞和凋亡，从而抑制人肝细胞癌，乳腺癌及食管癌，结肠癌，卵巢癌等肿瘤细胞的生长[9-11]。②放疗增敏作用。通过抑制放射线引起的潜在致死性损伤的修复，及诱导凋亡的作用，实现放疗增敏的作用[15]。③减毒作用。研究表明粉防己碱可通过增高人体内SOD活性降低脂质过氧化物水平，减轻阿霉素引起的心肌损害[16]，或通过抑制炎症反应而起到减轻毒性反应的作用[17]。④逆转耐药性。通过作用于P-糖蛋白(P-gP)，使其外排泵功能失活从而提高细胞内药物浓度[18]，或通过下调多药耐药相关蛋白(MRP)，逆转多药耐药(MDR)等机制抗肿瘤。
