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执业兽医资格考试内容(兽医临床诊断学)辅导(3)：动物血液常规检验指导方法
目的和要求
掌握红细胞及白细胞计数、血沉、血红蛋白、红细胞压积容量的检验操作方法及注意事项，所得的结果应基本正确。
内容和方法
一、红细胞计数
计算每mm8血液内所含红细胞数目，称为红细胞计数(Redb100dcellcount，简称RBCcount)。其计数方法有显微镜计数法，光电比浊法、电子计数仪计数法等，目前临床多采用在试管内稀释血液后的显微镜计数法。
(一)原理
用适当的稀释液将血液作200倍稀释，滴入计算室后，在显微镜下计数，经过换算即可求得每mms血液内的红细胞数。经稀释液作用虽仍保留白细胞，但对红细胞计数影响不大，因为一般情况下红细胞与白细胞之比约为1000：1。
(二)器械和稀释液
1.器械。器械包括以下方面。
(1)血细胞计中的计算板。常用的是改良纽巴(Neubauer)氏计算板。
(2)血细胞计中的红细胞吸管。
(3)血盖片。为血细胞计数专用玻片，厚度0.4mm，质地较硬。
(4)沙利氏吸血管、2ml刻度吸管，小试管、显微镜(图9-1、图9-2)。
2.稀释液。稀释液主要有以下两种。
(1)0.85％氯化钠溶液。
(2)赫姆(Hayem)氏液。由氯化钠1.0g，结晶硫酸钠5.0g，氯化高汞0。5g，蒸馏水加至
200ml，溶解后过滤备用。
(三)方法
1.试管稀释法。用2ml刻度吸管吸取红细胞稀释液2ml，置于小试管中。
用沙利氏吸血管10mm3(0.01m1)，擦去管外余血，轻轻吹入试管内稀释液底部，再吸上清液冲洗吸管3次，然后立即摇匀。
把血盖片覆盖于计算室上，用小玻棒沾取已混匀的红细胞悬液一滴，轻轻接触两者结合处，使悬液自然流入计算室内。静置3min后，即可计数。
在镜下计数时，先用低倍(10×)物镜找到计算室中央的大方格(红细胞计数区)，然后转用高倍(40×)物镜，计数中央大方格内四角的4个和中央的一个中方格，共计5个中方格(80个小方格)内的全部红细胞数(或用对角线的方法数5个中方格)。
为避免重复和遗漏，计数时要按一定的顺序进行。医学全在线,搜集整,理www.med126.com并且对压在方格左边和上边线上的红细胞均计在本格内，压在右边和下边线上的红细胞则不计在内，此即谓“数上不数下，数左不数右”的计数原则。
2.吸管稀释法。用血细胞计内的特制红细胞吸管吸血至o.5刻度外，再吸取稀释液至101刻度，即血液呈200倍稀释。然后，按上述方法在计算室上充液、观察并换算。
3.换算法。如缺乏显微镜等条件或大批普查时，对马的红细胞数可利用六五型血沉管来粗略换算。
通常是以静置1h的红细胞柱高的刻度数(不是血沉值)，减2乘以系数18.4万，也可以静置24h红细胞柱高的刻度数乘以21.6万，即得每mm3血液内的红细胞数。
(四)注意事项
血细胞计数都有一定的误差，其原因主要是仪器本身和技术操作上的缺陷，以及血细胞在计算室中分布的固有误差。为获得正确结果，应注意如下几方面的事项。
所有器材应清洁、干燥，符合标准，无损坏。试剂、血液符合检验要求。
吸血前混匀血液。吸稀释液和吸血要准。血柱中应无气泡，无血块，同时不要吸得过多。管外壁血迹要擦净。
充液前混匀检液。检液中应无沉淀。充液要均匀，不多，不少，无气泡。充液后不再振动计算板。
镜检计数要严格按顺序和原则进行(计数时误差一个细胞，计算时则要误差一万个细胞)，至少要计数五个中方格内的红细胞数，并且各中方格之间的红细胞最高数与最低数之差不应超过20个。
操作要快；最好重复检验2-3次，以验证准确性。
