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重组体BMP-2的生产

公开(公告)号 CN1484651A  
公开(公告)日 2004.03.24  
申请(专利)号 CN01821777.X  
申请日期 2001.11.27  
专利名称 重组体BMP-2的生产  
主分类号 C07K14/51  
分类号 C07K14/51;C12N15/67;A61K38/18  
分案原申请号  
优先权 2000.11.29 DE 10059336.4  
申请(专利权)人 斯尔蛋白质有限公司  
发明(设计)人 R·鲁道夫;E·施沃茨;G·赫尔  
地址 德国哈雷  
颁证日  
国际申请 PCT/EP01/13840 2001.11.27  
进入国家日期 2003.07.04  
专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所  
代理人 吴亦华  
国省代码 德国;DE  
主权项 重组地制备TGF-β超家族的生物活性蛋白质的方法,其特征在于,(a)一种蛋白质,其末端由一种TGF-β超家族蛋白质的前序列或部分所述前序列组成,该氨末端与此种或另一种TGF-β超家族蛋白质的成熟区域连接,该蛋白质与成熟BMP-2至少有35%同源性,在至少部分蛋白质能以包含体的形式而获得的条件下将所述蛋白质于原核生物中进行表达;(b)分离包含体并在变性条件下溶解;(c)将从包含体中溶解的、变性的、单体的和无生物活性的蛋白质复性,使之通过折叠和二聚体化能够形成可溶的、有生物活性的构;和(d)如果必要,在复性之后经蛋白质水解将成熟蛋白质从其前体形式中释放出来。  
摘要 为了重组生产一种TGF-β超家族的生物活性蛋白质,将蛋白质在原核生物中表达。该被表达蛋白质的氨末端由一种TGF-β超家族蛋白质的前序列或其部分组成,将该蛋白质或另一种TGF-β超家族蛋白质的成熟区域连接到该蛋白质上,所连接上的蛋白质具有和成熟BMP-2至少35%的同源性。蛋白质的表达在至少有一部分蛋白质以包含体的形式而获得。分离出包含体,并在变性条件下溶解。从包含体中溶解的、变性的、单体的和无生物活性的蛋白质经过折叠和二聚体化变性形成可溶的、有生物活性的构象,必要时,在复性之后将成熟蛋白质从其前体形式中经蛋白水解而释放出来。  
国际公布 WO02/44203 德 2002.6.6  
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