| 公开(公告)号 | CN1151173C |
| 公开(公告)日 | 2004.05.26 |
| 申请(专利)号 | CN02136033.2 |
| 申请日期 | 2002.07.12 |
| 专利名称 | 神经营养因子的生产方法 |
| 主分类号 | C07K14/435 |
| 分类号 | C07K14/435;C07K14/48;C12P21/02;C12N15/12 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 杭州九源基因工程有限公司 |
| 发明(设计)人 | 黄岩山;王昌梅;裘霁宛;李辉 |
| 地址 | 310018 浙江省杭州市下沙经济技术开发区8号大街东 |
| 颁证日 | 2004.05.26 |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 张法高 |
| 国省代码 | 浙江;33 |
| 主权项 | 一种神经营养因子的生产方法，其特征在于通过计算机辅助设计，对人睫状神经营养因子的基因进行修饰改造，获得如图1所示的改造后突变人睫状神经营养因子基因的cDNA，人工合成该cDNA，构建重组质粒，转化大肠杆菌，经全自动发酵罐高密度表达；以切向流超滤方式进行复性；以离子交换层析、疏水层析和分子筛层析顺序组合纯化，生产得到高纯度的睫状神经营养因子。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种神经营养因子的生产方法。它通过计算机辅助设计，对人睫状神经营养因子的基因进行修饰改造，获得改造后突变人睫状神经营养因子基因的cDNA，人工合成该cDNA，构建重组质粒，转化大肠杆菌，经全自动发酵罐高密度表达；以切向流超滤方式进行复性；以离子交换层析、疏水层析和分子筛层析顺序组合纯化，生产得到高纯度的睫状神经营养因子。本发明的优点：1)采用计算机辅助设计，对天然密码子进行了优化，实现了突变体在大肠杆菌中的稳定高表达。2)采用切向流超滤方式复性，可减少超滤过程中的极化现象。3)离子交换层析、疏水层析和分子筛层析三种不同分离机理层析顺序组合，使复性后的CNTF得以纯化精制，其纯度均大于95％。 |
| 国际公布 |
