公开(公告)号 | CN1526829A |
公开(公告)日 | 2004.09.08 |
申请(专利)号 | CN03113853.5 |
申请日期 | 2003.03.04 |
专利名称 | 病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法 |
主分类号 | C12Q1/68 |
分类号 | C12Q1/68;C12Q1/04 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国人民解放军基因工程研究所 |
发明(设计)人 | 马文丽;郑文岭;石嵘 |
地址 | 510515广东省广州市同和第一军医大学分子生物学研究所 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 广州知友专利代理有限公司 |
代理人 | 邵毓琴 |
国省代码 | 广东;44 |
主权项 | 病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法,包括以下步骤:(1)玻片的准备;(2)探针准备:采用PCR扩增病原体全基因组的各个基因和特异性片段,探针长度从数百到数千碱基不等,浓度在0.25~0.5μg/μL;(3)芯片制备:采用基因芯片点样仪进行点样;(4)打印后处理;(5)样品的处理:在PCR扩增过程中,Cy5-dUTP进行掺入标记,在标记前或标记后引入限制性酶切,使获得片段长度在200~600bps之间;(6)杂交:2×杂交缓冲液的配方为60%甲酰胺、12×SSC、0.24%SDS;(7)杂交后清洗;(8)扫描检测。 |
摘要 | 本发明公开了一种病原微生物诊断型基因芯片的快速检测方法,包括以下步骤:(1)玻片的准备;(2)探针准备:采用PCR扩增病原体全基因组的各个基因和特异性片段,探针长度从数百到数千碱基不等,浓度在0.25~0.5μg/μL;(3)芯片制备:采用基因芯片点样仪进行点样;(4)打印后处理;(5)样品的处理:在PCR扩增过程中,Cy5-dUTP进行掺入标记,在标记前或标记后引入限制性酶切,使获得片段长度在200~600bps之间;(6)杂交:2×杂交明冲液的配方为60%甲酰胺、12×SSC、0.24%SDS;(7)杂交后清洗;(8)扫描检测。本发明具有标记效率高、杂交检测结果稳定、杂交时间大大病短等优点,可将杂交时间从传统的16~20小时缩短到10分钟,尤其适用于临床感染性疾病的诊断。 |
国际公布 |