公开(公告)号 | CN1687413A |
公开(公告)日 | 2005.10.26 |
申请(专利)号 | CN200510066193.1 |
申请日期 | 2005.04.21 |
专利名称 | 重组人睫状神经营养因子突变体及其制备方法 |
主分类号 | C12N15/12 |
分类号 | C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/435 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 梁亮胜 |
发明(设计)人 | 朱俊铭;雷继军;李清雄;王革非;余永恒;张晓林;张光勋;文 力 |
地址 | 430019湖北省武汉江岸区黄浦大街丝宝国际大厦 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京集佳知识产权代理有限公司 |
代理人 | 刘继富;顾晋伟 |
国省代码 | 湖北;42 |
主权项 | 一种制备hCNTF突变体的方法,包括下列步骤:(a)将hCNTF突变体基因序列克隆入表达载体以得到重组载体,并导入大肠杆菌中,生成含有重组载体的基因工程菌;(b)培养基因工程菌至OD600=12~14时,加入乳糖,诱导hCNTF突变体在基因工程菌中可溶性表达;(c)诱导后,向培养液中缓慢加入葡萄糖作为主要碳源,并控制培养液中溶解氧值为10%~15%,继续培养;(d)待基因工程菌的OD600=20-30时,收获菌体,并将菌体破碎得到破菌液;(e)纯化破菌液,得到纯化产品。 |
摘要 | 本发明涉及重组蛋白和其制备方法,具体涉及重组人睫状神经营养因子(简称hCNTF)突变体及其制备方法,更具体的说,本发明涉及用乳糖诱导hCNTF突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达、并从中加以分离纯化的方法,以及通过该方法制备的hCNTF突变体。 |
国际公布 |