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用于扩增核酸序列的方法

公开(公告)号 CN1227357C  
公开(公告)日 2005.11.16  
申请(专利)号 CN00807534.4  
申请日期 2000.03.14  
专利名称 用于扩增核酸序列的方法  
主分类号 C12N15/10  
分类号 C12N15/10;C12Q1/68  
分案原申请号  
优先权 1999.3.19 JP 76966/99;1999.12.27 JP 370035/99  
申请(专利权)人 宝生物工程株式会社  
发明(设计)人 向井博之;山本纯子;武田理;三宅一惠;上森隆司;佐藤好美;森山麻里子;椹木治久;萩屋道雄;浅田起代蔵;加藤郁之进  
地址 日本大津市  
颁证日  
国际申请 2000-03-14 PCT/JP2000/001534  
进入国家日期 2001.11.13  
专利代理机构 中国专利代理(香港)有限公司  
代理人 建成  
国省代码 日本;JP  
主权项 一种扩增核苷酸序列或大量生产核酸的方法,其特征在于所述方法包括:(a)通过混合模板核酸、三磷酸脱核糖核苷酸、具有链置换活性的DNA聚合酶、至少一种引物和切割由引物产生的延伸链的内切核酸酶制备反应混合物,其中所述引物为与所述模板核酸的核苷酸序列基本互补而且包含脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸的嵌合寡核苷酸引物,所述核糖核苷酸位于所述引物的3’-末端或3’-末端侧上;以及(b)在所述引物可特异性地退火至模板核酸上、发生延伸链合成反应和所述DNA聚合酶的链置换反应以及内切核酸酶切割延伸链的反应的条件下,温育反应混合物足够时间,以产生反应产物。  
摘要 一种简便有效扩增核酸序列的方法,其特征在于在存在嵌合寡核苷酸引物的情况下完成DNA合成反应;一种提供大量DNA扩增片段的方法;一种通过联用上述方法和另一种核酸序列扩增方法而扩增核酸序列的有效方法;一种检测核酸序列的方法,它用于检测或定量微生物,例如病毒、细菌、真菌或酵母;以及一种检测上述方法原位获得的DNA扩增片段的方法。  
国际公布 2000-09-28 WO2000/056877 日  
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