公开(公告)号 | CN1786154A |
公开(公告)日 | 2006.06.14 |
申请(专利)号 | CN200510015492.2 |
申请日期 | 2005.10.18 |
专利名称 | 人胎盘、脐带间充质干细胞库及其构建方法 |
主分类号 | C12N5/08(2006.01)I |
分类号 | C12N5/08(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 天津昂赛细胞基因工程有限公司 |
发明(设计)人 | 韩忠朝;刘拥军 |
地址 | 300457天津市泰达开发区第四大街天大科技园B3-B4 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 |
代理人 | 陆 艺 |
国省代码 | 天津;12 |
主权项 | 一种人胎盘、脐带间充质干细胞库,其特征是由下述步骤建成: (1)取人胎盘、脐带进行ABO/Rh血型检测、HLA分型的检测、微生物免疫检测,用磷酸缓冲液冲洗去除残留血液,粉碎,加入1~1.5倍于粉碎物体积的磷酸缓冲液稀释; (2)加入步骤(1)所获得溶液体积的1/2~1/3的质量/体积比为0.05%~0.2%的胶原酶磷酸缓冲液溶液消化,温度为37℃,消化40~70分钟,过100-200目筛,将滤过的细胞混悬液与未消化组织分开; (3)向未消化组织中,加入1~1.5倍于未消化组织体积的磷酸缓冲液稀释; (4)加入步骤(3)所获得溶液体积的1/2~1/3的质量/体积比为0.05%~0.2%的胰酶磷酸缓冲液溶液消化,消化温度为37℃,消化时间为10~30分钟,在此100ml溶液中加入1-2g的血清终止胰酶作用,过100-200目筛,滤过液为细胞混悬液; (5)将步骤(2)及步骤(4)所获得的细胞混悬液混合,离心,弃去上清液,用磷酸缓冲液洗涤1~3次去除残余酶,再离心,弃去上清液,即获得间充质干细胞; (6)将间充质干细胞置液氮冷冻,按其ABO/Rh分型和HLA分型进行保存,建立可供检索的细胞信息档案,即构建出人胎盘、脐带间充质干细胞库。 |
摘要 | 本发明公开了一种人胎盘、脐带间充质干细胞库及其构建方法,本发明的构建步骤包括:(1)取人胎盘、脐带进行检测,用磷酸缓冲液冲洗涤后粉碎,加磷酸缓冲液稀释;(2)加入胶原酶消化;(3)加入磷酸缓冲液稀释;(4)加入胰酶消化;(5)将步骤(2)及步骤(4)所获得的细胞混合,离心,弃去上清液,用磷酸缓冲液洗涤,再离心,弃去上清液,即获得间充质干细胞;(6)将间充质干细胞置液氮冷冻,按其ABO/Rh分型和HLA分型进行保存,建立可供检索的细胞信息档案,即构建出人胎盘、脐带间充质干细胞库。本发明为新生儿储存胎盘及脐带间充质干细胞,为其本人、家属和他人提供间充质干细胞治疗疾病及其他应用。 |
国际公布 |