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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:荷叶—槲皮素、荷叶碱—HPLC-UV中药质量控制方法/操作步骤
    

荷叶—槲皮素、荷叶碱—HPLC-UV

  
方法名称:
  荷叶—槲皮素、荷叶碱—HPLC-UV
应用范围:
  用于荷叶中槲皮素、荷叶碱的含量测定
方法原理:
 

1.本品粉末用甲醇超声提取,提取液再用盐酸、甲醇酸化处理,经液相色谱仪分离,在270nm处测定,按外标法计算槲皮素的含量。

2.本品粉碎后,用水-氯仿超声提取,蒸干,用甲醇溶解,经液相色谱仪分离,在270nm处测定,按外标法计算荷叶碱的含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备   德国戴安Summit 高效液相色谱仪;UVD170U 多波长紫外检测器;Chromeleon色谱工作站。

色谱条件 

1.槲皮素  岛津CLC-ODS柱(6.0×150mm );流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(48∶52);流速:1.0mL ·min-1;检测波长:360nm;

2.荷叶碱 岛津CLC2ODS 柱( 6.0×150mm );流动相:甲醇-水-二乙胺(75∶25∶0. 01) ;流速1.0 mL ·m in-1,检测波长:270 nm。
试样制备:
 

对照品溶液的制备

1.精密称取槲皮素对照品,加甲醇溶解并制成0. 032 m g·mL-1的溶液,作为对照品溶液。

2.精密称取荷叶碱对照品置量瓶中,加甲醇超声使溶解并制成0. 306 m g ·mL-1 的溶液,作为对照品溶液

供试品溶液的制备

1.精密称取药材粉末约1g,置锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,称定重量,超声处理20min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10 mL,加甲醇10 mL、25% 盐酸溶液5mL,摇匀,置水浴中加热回流30min,迅速冷却至室温,甲醇定容至50mL量瓶中,作为供试品溶液。

     2.取药材粉末1 g,精密称定,置锥形瓶中,加浓氨水约0.5mL 使润湿,精密加入氯仿50mL,加热回流1h,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇分次超声溶解并定容至25 mL 量瓶中,摇匀,用微孔滤膜(0.45μm) 滤过,作为供试品溶液。
操作步骤:
  分别吸取两种对照品溶液和两种供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,按拟定色谱条件测定,以外标法计算槲皮素、荷叶碱含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  邬晓,熊英. 荷叶质量标准研究. 现代中药研究与实践.2004.18(4):27~29
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