苦参生物碱部位—氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱—HPLC

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方法名称：	苦参生物碱部位—氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱—HPLC
应用范围：	本方法适用于苦参生物碱部分中氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱含量的测定
方法原理：	本品生物碱部位加70 %乙醇超声溶解，经液相色谱分离，在220 nm处测定峰面积，外标法计算含量
仪器设备及实验条件：	仪器 Waters515高效液相色谱仪；2487紫外检测器；Empower软件；25 μL可调进样器色谱条件色谱柱：Agilent Zorbax C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：溶剂A为10 mmol/L醋酸氨水溶液（0.1 %氨水，pH=9.2)，溶剂B为20 mmol/L醋酸铵的甲醇-乙腈（1∶1)混合溶液，洗脱条件为溶剂A-溶剂B梯度洗脱（90∶10→82∶12→66∶34→60∶40，时间：0 min→8 min→14 min→28 min)；流速：0.8 mL/min；检测波长：210 nm；柱温：35 ℃
试样制备：	对照品溶液的制备精密称取氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱对照品2.53、2.75、2.58和1.56 mg，分别置25 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，备用。供试品溶液的制备苦参药材用稀醇回流提取，提取物加水分散，离心，得水溶液和不溶物，不溶物加酸水超声分散，离心，得酸水液，与上述水溶液合并，调中性后浓缩至一定体积，再继续调pH至8，通过大孔吸附树脂柱树脂柱水洗除杂后，用稀醇洗脱，收集醇洗脱液，回收溶剂至干，残留物减压干燥，得苦参生物碱部位。精密称取苦参生物碱部位约5 mg，置5 mL量瓶中，加70 %乙醇超声溶解，并稀释至刻度，摇匀，备用。
操作步骤：	分别精密吸取氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱对照液以及苦参生物碱部位供试品溶液各15 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱含量。
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备注：
参考文献：	朱丽君，刘斌，石任兵.HPLC法测定苦参生物碱部位中4种成分含量.北京中医药大学学报. 2007.30（11)：780~783