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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:决明子-大黄酚的含量测定方法-HPLC1中药质量控制方法/操作步骤
    

决明子-大黄酚的含量测定方法-HPLC1

  
方法名称:
  决明子-大黄酚的含量测定-HPLC1
应用范围:
  用于决明子中大黄酚的含量测定
方法原理:
 本品粉末加氯仿-甲醇(1∶1)提取,经液相色谱分离,在254 nm处测定峰面积,外标法计算含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  HP1100高效液相色谱仪,G1311A-四元泵,G1322A-脱气机,G1316A-柱温箱,1314A-UV可变波长检测器,HPRev.A.0501化学工作站

色谱条件 

色谱柱:SUPELC0SIL T mLC18Column 5 μm4.6 mm×250 mm)

流动相:甲醇—0.5 %醋酸水溶液(75∶25)

流速:1.0 mL/min

测定波长:254 nm

柱温:40 ℃
试样制备:
 

对照品溶液制备    精密称取大黄酚对照品8.0 mg,置于25 mL容量瓶中,加氯仿-甲醇(1∶1)溶解并稀释至刻度,制成0.32 mg/mL浓度的对照品溶液。

供试品溶液制备    1)游离大黄酚样品液:精密称取生、炒决明子粉末(过60目筛)2.5 g,置圆底烧瓶中,加入氯仿-甲醇(1∶1)混合液25 mL,水浴加热(60 ℃)回流1小时,滤过,减压回收溶剂至干。加入氯仿-甲醇(1∶1)混合液溶解,转移至10 mL容量瓶中,稀释至刻度,摇匀静置,用0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。2)总大黄酚样品液:精密称取生、炒决明子粉末(过60目筛)2.5 g,置圆底烧瓶中,加入甲醇25 mL,水浴加热(60 ℃)回流2小时,放至室温,滤过,回收溶剂至干,加入3 %盐酸溶液30 mL,直火水解1 h,放至室温,加入氯仿30 mL,水浴回流15 min,放至室温。用分液漏斗分出氯仿层,用少量蒸馏水分2次洗涤,回收溶剂至干。加入氯仿—甲醇(1∶1)混合液溶解,转移至10 mL容量瓶中,稀释至刻度。精密吸取1 mL,稀释至10 mL,用0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
操作步骤:
  分别精密吸取大黄酚对照液以及决明子供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。以外标法计算大黄酚含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  戚爱棣,阎雪梅,王虹. 液相色谱法测定决明子中大黄酚的含量. 天津中医学院学报. 2002,21(3):49~50
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